对苯二酚氧化损伤DNA的电化学检测.pdf

1月 湖北·武汉 2006年l 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 对苯二酚氧化损伤DNA的电化学检测 赵俊，杨周生+ (安徽师范大学化学与材料科学学院，安徽芜湖241000) 中。用示差脉冲技术检测DNA受损后所产生的嘌呤碱基氧化电流信号，确定DNA的受损程度． 关键词：对苯二酚；DNA损伤；玻碳电极预处理 对苯二酚(1，4一HQ)是苯酚的一种衍生物，普遍存在于食品及化妆品中[1】。高浓度的对苯二酚 会导致神经系统紊乱【2】、对肾脏造成损伤以及引发白血病等[1】。已有报道表明在细胞的信息转 到预处理后的玻碳电极表面，通过电化学方法，考察DNA分子中嘌呤碱基的氧化电流信号，检 测对苯二酚对DNA的损伤。 1实验部分 1．1仪器与试剂 对苯二酚购于上海试剂公司。缓冲溶液为O．1M的HAc-NaAc混合溶液。 1．2实验方法 玻碳电极抛光成镜面后，置于o．1M 5．0的磷酸缓冲溶液中，于+1．75V下氧化处理300s， pH 后在+O．3到+1．25V的电位范围，进行连续循环伏安扫描至稳定。在处理好的玻碳电极表面，滴 5．0 加201．tl mg／mL的DNA溶液，放置于冰箱中。 2结果和讨论 2．1对苯二酚对DNA的氧化损伤 104M CuS04的1．Ox 将新制备的DNA／GCE(ox)修饰电极放置于含有50I．tM 1,4-HQ溶液中， 在一定的温度下，放置不同的时间。然后取出电极，用缓冲溶液淋洗，电极转入O．10M 5．0 pH 差脉冲伏安曲线如图曲线a所示。没有发现DNA分子中嘌呤碱基的氧化峰。这一结果说明：在 Cu2+存在下，对苯二酚能使DNA分子结构改变，造成DNA分子损伤。 ‘通讯联系人 2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 Differential with acetatebuffer Fig．1 pulsevoltammogramsDNA／GCE(ox)inpH5．0，O．1M with with 1 and 1．0x0‘5M (a)withoutincubating1，4-HQ；(b)incubated1，4一HQ 509MCuS04． 的氧化损伤是因为它们形成了配合物(Cu(I)OOH)[6]。 2．2实验条件的优化 在同样条件下，随着DNA浓度的增长，DNA碱基的氧化峰电流增大，最终的实验选择DNA cm～。讨论了该修饰电极在不同底液中的伏安行为，实验结果表明：在0．1M 的浓度为1．45rag HAc．NaAc缓冲体系中电化学响应的峰电流最大，灵敏度最高。缓冲溶液在pH5．0时，峰电流最 大，峰形较好。 参考文献： orl [1】‘FocusPigments”，2006，Issue：3，March，PP．6 forsmoke—free March1999． [2]Physicians Canada,Cited S．Cancer 172-5178． Y，KawanishiRes，1 [3】Hiraku 996，56：5 AJ A 12-320． [4】JosephPKlein-SzantoP