血细胞参数检测的参考方法及其应用.pdfVIP

临床检验杂志2003年第2l卷第6期 Chinese Joumal of Clinical[al~ratory Science，2OO3，Vo1．21，No．6 -369 文章编号 1001．764x(2o03)06-0369-03 中图分类号：R446．113 文献标识码：A · 综述· 血细胞参数检测的参考方法及其应用 彭黎明 ，蒋能刚 (1．北京大学深圳医院检验科，深圳518036；2．四川大学华西医院检验科) 关键词：参考方法；血细胞 自动化血液分析仪须进行校准才能保证分析结果的准 除去颗粒杂质，并对所使用的分光光度计以HiCN标准液进 确性，而校准血液分析仪所测参数需用相应的参考方法Ll J。 行校正，这是测定的关键之一。目前所用的国际HiCN标准 按照国际血液学标准化委员会(IcsH)的定义L2J，参考方法除 液按Holtz法制备，其浓度为550～850 ms／L，保持清洁无菌， 用于评价常规方法和校正仪器外，也可用于质控品定值及鉴 性质稳定，其吸收光谱特征符合国际HiCN参考品的要求[6l。 定商品试剂盒等。目前，ICSH和美国临床检验标准化委员会 3 红细胞比容(PCV)测定 (NCCLS)已经建立了红细胞和白细胞计数、血红蛋白测定、红 PcV的常规测定方法有离心法、稀释法及电阻抗法等， 细胞比容测定、网织红细胞计数、血小板计数及白细胞分类 其中以离心法重现性较好(微量离心法测定PCV的 CV值为 计数的参考方法。现对这些参考方法及其应用予以简述。 l％～2％)，但因残留血浆及其他因素的影响[7-8]，特别是在 1 红细胞(RBC)和白细胞(WBC)计数 病理情况下，其结果欠准确。ICSH曾于 1980年推荐在 传统的参考方法是在计数池内对稀释的血液进行 RBC Wintrobe管离心法的基础上用放射性核素标记的人白蛋白对 和WBC直接计数。由于血液稀释不易准确，充池难做到一 残留血浆进行校正，并以此作为参考方法[ 。该法是PCV测 致，结果会产生较大的误差。细胞浓度过低时尤甚。该法在 定最准确的方法，但因其实验要求的特殊性，非普通实验室 一 般临床实验室中计数RBC的不精密度(cv)可达5％～ 所能开展。 10％，计数WBC的CV值为6％～9％L3J，已不适于作为参考 目前，ICSH制定了新的PCV测定的参考方法IsJ，即通过 方法。ICSH推荐使用电阻抗法半自动单通道血液分析仪计 测定全血Hb浓度与平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)，间接 数细胞代替直接计数法[1-2]，并在1994年进行了修订，将其 得到红细胞比积(Hb／MCHC法)。该方法的基本测定步骤是 确定为参考方法。 先将EDTA-K2或EDTA-K3抗凝的静脉血用硅酸硼制成的 现行RBC和WBC计数的参考方法，是将血液稀释一定 PCV测定参考毛细管在一定条件下离心。离心后去血浆和上 倍数后用 ICSH推荐的血液分析仪计数一定体积内的细胞 层压积RBC，吸取压积RBC的中央部分。因为残留血浆和白 数，并换算成每升血液内的细胞数。计数 WBC时，用 WBC 细胞多存在于压积RBC的上层，且中央层较下层的RBC形 稀释液溶解RBC。标本是用EDTA-K2抗凝的静脉血。EDTA- 态损伤小，中央层的压积红细胞血红蛋白浓度可视为MCHC。 K2的最终浓度为1．5～2．2 g／L。测定时不能用溶血或有微 吸取的压积RBC和全血都按 ICSH所制定的参考方法测定 凝块的标本。同时，盛血容器体积要合适，以有足够的空间 Hb浓度。因为MCHC=Hb／PCV，故PCV=Hb／MCHC。即得到 混匀血液。测定前将容器轻轻倒转几次混匀血液，但不能用 Pcv。测定过程中吸取全血和压积RBC应使用同一支标准 旋涡混匀器。计数仪通道直径8o～100／an，通道长度为直径 化吸管，以避免吸管间差异所引起的误差。每一标本应同时 的70％～100％，仪器信噪比大于100：112J。 作双份测定。Hb／MCH