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容量激活性氯离子通道在低氧高二氧化碳处理的大鼠PASMCs的表达及其与MAPK通路的关系.pdf
中国病理生理杂志 Chinese Joumal of Pa由ophysiology 2014 .30( 1) :25-29 .25.
[文章编号] 1仪lO-4718 (2014) 01-∞25-05
容量激活性氯离子通道在低氧高二氧化碳处理的大鼠
PASMCs 的表达及其与 MAPK 通路的关系*
黎关龙1 ，2血， 黄林静IA ， 何金波1 ， 马迎春1 ， 陈海娥l ， 应磊1 ， 汪 洋l ， 王万铁16
e温州医科大学基础医学院病理生理学教研室，浙江温州 325035;
2浙江省医学科学院卫生学研究所毒理学研究室，浙江杭州 31∞13 )
[摘要] 目的:探讨容量激活性氯离子通道(CLC3 )在低氧高二氧化碳处理的大鼠肺动脉平滑肌细胞
(PASMCs) 中的表达变化及其与 MAPK信号通路的关系。方法:酶消化法取雄性 SD 大鼠 PASMCs 进行原代培养，
采用小鼠抗大鼠 α·平滑肌肌动蛋白免疫荧光细胞化学法进行细胞鉴定:复制低氧高二氧化碳模型，采用免疫印迹
法检测 CLC3蛋白的表达;采用 RT-PCR 技术测定 CLC3 mRNA 水平的表达。结果: (1)与对照组比较，低氧高二氧
化碳组 PASMCs CLC3 mRNA 和蛋白表达量均显著上调(均 P0.01);(2)与低氧高二氧化碳组比较，ERK 抑制剂
U0l26 +低氧高二氧化碳组 PASMCs CLC3 mRNA 和蛋白表达量均显著下调(均 P 0. 01) ;p38 抑制剂 SB203580 +
低氧高二氧化碳组 PASMCs CLC3 mRNA 和蛋白表达量均明显上调(均 P 0, 01) ;p38 激活剂菌香霉素+低氧高二
氧化碳组 PASMCs CLC3 mRNA 和蛋白表达水平均显著下降(P 0. 05 和 PO.OI) 。结论:低氧高二氧化碳可上
调大鼠 PASMCs CLC3 mRNA 和蛋白的表达;ERK1I2 通路介导了低氧高二氧化碳诱导的大鼠 PASMCs CLC3 表达，
而 p38 MAPK通路活化则下调低氧高二氧化碳诱导的 CLC3 mRNA 和蛋白表达。
[关键词] 低氧;高碳酸血症;容量激活性氯离子通道; p38 MAPK 通路; ERK1/2 通路;大鼠
[申固分类号] R363 [文献标志码] A doi: 10. 3969/j. issn. 1仪lO-4718. 2014.01.ω4
Expression of volume-activated chloride channel in rat PASMCs treated
with hypoxia and hypercapnia and its relationship with MAPK pathway
U Guan-Iong
1
?
2
, HUANG Lin-jingl , HE Jin-bo
l
, MA Ying-chun
1
, CHEN Hai-e
l
, YING
Lei
1
, WANG Yang
1
, WANG Wan-tie
1
( 1 Department 01 Pat1wphysiology , Sciwol 01 Basic Medical Sciencω ， Wenz1wu Medical University , Wen动ou 325035 , China;
2 Toxicology Laboraω厅， Z，均如zg Prov?ncial Academy 01 Medical 必ienc，ω and 晶alth lnstit睛? Ha咱蚀。u 31∞13 ， China.
E-mω:l: wwt@ wzmc. edu. cn)
[ABSTRACT] AIM: To investigate the expression ofvolume-activated chloride channel (CLC3) in rat pulmonary
M町 smooth muscle cells (PASMCs) treated wi由 hypoxia and hypercapnia and its relationship with MAPK p拙.way.
如fEl回ODS: The method of enz严ne digestion wωused ωisolate the PASMCs in male SD rat for cell primary culture. The
cells were identified by immunofluorescence cyt侃hemical method wi由 mouse anti-ratα-sm∞th muscle actin antibody. The
rat
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