利用RFLP,SSR,AFLP和RAPD标记分析玉米自效系遗传多样性的比较研究.pdfVIP

@725一 遗 传 学 报，27 (8) Acta Gene出 n 曲 ，ica 利用 RFLP、SSR、AFLP和 RAPD标记 分析玉米 自交 袁力行 ，傅骏骅 ， 究 f{， ； J Khairalah M ，刘新芝 ，彭泽斌 ，李连城 ’ 一 (I 中国农业科学 院作物所 农业部作物遗传育种重点开放实验室．北京 100081~ 2 国际玉米小麦改 良中心应用生物技术中心，墨西哥城 06600．墨西哥 ) 摘耍：利用 RFLP、SSR、AFLP和 RAPD 4种分子标记方法研究 了 1 5个玉米 (Zea mays L)自 交系的遗传多样性 ，同时对 4种标记系统进行 比较。在供试材料中筛选到具多态性 的RFLP探 针酶组合 56个，66对 SSR引物，20个 RAPD~l物和 9个 AFLP引物组合，分别检测到多态性带 167、201、87和 108条。SSR标记位点的平均多态性信息量(PIc)最大 (0．s4)，AFLP标记位点 最小 (0．36)，但 AFLP标记具有最高的多态性检测效率 (Ai，32．2)。4种分子标记所得遗传相似 系数相关性 显著，比较相关系数表明 RAPD可靠性较低 依据 4种分子标记结果将 15个供试 自交系划分为塘 四平头、旅大红骨、兰卡斯特、瑞德和 PN共 5个类群 ，与系谱分析基本一 致． 认为 SSR和 RFLP两种分子标记方法适合进行玉米种 质遗传 多样性的研究。 关键词：玉米；分子标记；遗传多样性 中圈分类号 ：Q34I 文献标识码 ：A 觳缸 斜陵簧 文章编号 ：0379-4172(20oo)08-0725-09 种质的遗传多样性评价是作物育种研究的重要内容，它决定了这些种质在今后育种实 践中的有效利用，在玉米杂交育种中尤为突出；以往形态标记、系谱分析、配合力表现以及 同工酶等方法相继被用于遗传多样性研究，但表现 出明显的局限性口】 DNA分子标记技术 的 发 展 为 遗 传 多 样 性 研 究 提 供 了 新 的 手 段。吼 P(Restricfion Fragment Length Polymorphism)0 技术最先被用于玉米种质的遗传变异研究。Mumm等 和 Dubreuil等 成功 地利用 RFLP标记对欧}I}I和北美的常用玉米 自交系进行了杂种优势群划分。随后基于 PCR 技术 的分 子标记 逐 步发 展起 来，如 RAPD(Random Amplifcation Polymorphic DNA) ， SSR(Simple Sequenc~ Repe神 和 AFLP(Amplification Fragment k ngⅡ1 Polymorphism) J， 被广泛用于玉米种质的遗传多样性研究。刘新芝等Is]利用 RAPD标记首次对我国玉米 自交 系进行了杂种优势群划分。Smith等 利用 SSR标记对 58个玉米 自交系进行遗传多样性研 究，其结果与RFLP标记和系谱分析基本一致。Ajmode等 利用 6个 AFLP引物组合研究 l3 收藕 日期；1999—12-06~修 订日期：2000-03—14 基盒璃 目： 九五 国家重点科技攻关项 目(96_002_02_05_4)．国家攀登计划 (PD-XZ-3-2)，亚洲玉米生物技 术协作 眄(Arcmiorc~r)基金资助 作者筒介：袁力行 (1975)，男 ．江西^ ，礤士，研究方向：分子遗传学 726 遗 传 学 报 27卷 个玉米自交系的遗传变异，并探讨了利用AHJP标记预测杂种优势的可能性 不同分子标记 在遗传多样性研究中表现出各 自的特性。Pcjic等? 利用 RFu SS1L AFLP和 RAPD 4种分 子标记方法分析了 31个玉米 自交系的遗传多样性，并对不同标记系统的相对效率进行 比较 研究；类似的研究在小麦、大麦、大豆等作物中都有文献报道 。本研究以我国玉米生产 上的骨干 自交系为材料，研究其遗传多样性，为育种实践提供信息；同时对 4种分子标记结 果进行 比较，筛选出合适的分子标记体系用于我国玉米种质遗传多样性的进一步研究 1 材料和方法 1．1 供试材料 所选 1 5个供试材料为我国玉米生产及育种上广泛应用的骨干 自交系，其名称和系谱 来源见表 1 供试材料均经多年 自交，遗传稳定(图版 卜l～4) 表1 玉米自空系及系谱来源 Table l M flJze inbred lines aud their pedigrees 1．2 分子标记分析 1．2．1 DNA提取 玉米植株于温室生长 8～10W 后，每个 自交系取 l0w12株混台收获 叶片。按 Saghai-Maroof CTAB方法抽提并纯化 DNAt”1。 1．2．2 RFLP分析 采用地高