细胞生物学-陈威13 第十三章 细胞周期与细胞分裂.pdfVIP

1第十三章细胞周期与细胞分裂 内容提要： 第一节 细胞周期 第二节 细胞分裂 2 ? Cell proliferation （细胞增殖） ? Cell division （细胞分裂） ? Cell cycle （细胞周期） /sites/default/files/figure-03-23.jpg p273 细胞从一次细胞分裂 结束后开始，物质积累 到下一次细胞分裂完成 ，所经历过程。 时相 M期 S期 G2期 G1期 分裂间期 一.细胞周期概述 第一节 细胞周期(cell cycle) (interphase) 4 根据细胞类型长短不 一，以分钟--小时--天- -年等计。 细胞类型 细胞周期时间 早期的蛙胚细胞 30分钟 黑麦根尖细胞 71～155分钟 酵母细胞 1.5～3小时 蝗虫神经母细胞 ～3小时 肠表皮细胞 ～12小时 紫鸭跖草根尖细胞 ～17小时 蚕豆根尖细胞 ～19小时 培养的哺乳动物成纤 维细胞 ～20小时 人的肝细胞 ～1年 细胞周期 5 6哺乳动物细胞周期时间 细胞类型 TC TG1 TS TG2+M 人 结肠上皮细胞 25 9 14 2 直肠上皮细胞 48 33 10 5 胃上皮细胞 24 9 12 3 骨髓细胞 18 2 12 4 大鼠 十二指肠隐窝细胞 10.4 2.2 7.0 1.2 内釉质上皮细胞 27.3 16.0 8.0 3.3 肝细胞 47.5 28.0 16.0 3.5 小鼠 十二指肠上皮细胞 10.3 1.3 7.5 1.5 结肠上皮细胞 19 9 8 2 皮肤上皮细胞 101 87 11.82 2.18 ?周期中细胞(cycling cells) ---干细胞（Stem cells） ?终末分化细胞---结构、功能高度 特化的细胞 ?静止期细胞---G0期细胞 如免疫淋巴细胞、肝、肾细胞等 根据增殖状况，细胞分为三类 7 开始合成细胞生长所需要的多种RNA、蛋白质、碳水化合 物、脂等，同时染色质去凝集。 DNA复制与组蛋白合成同步，组成核小体串珠结构。S期DNA合 成不同步(常染色质、有转录活性的、GC含量高的优先复制) S期 G1期 细胞沿着G1→S→G2→M→G1周期性运转 二.细胞周期时相 在G1期的晚期有一个检验点，监控着细胞是否进入S期。称为限制点(restriction point,R点)或检验点(checkpoint)。 G2期 DNA复制完成，在G2期合成一定数量的ATP、 RNA 和蛋白质分子（包括微管蛋白、促成熟因子MPF）等 M期 M期即细胞分裂期，真核细胞的细胞分裂主要包括两种 方式，即有丝分裂(mitosis)和减数分裂(meiosis)。 8 DNA复制与组蛋白合成同步 T 3H-亮氨酸 14C-胸腺嘧啶脱氧核苷 9 细胞周期时间的测定 1.脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法 （percentage labeled mitosis，PLM）： 原理：放射标记、定期取样、自显影统计被标记有丝分裂细胞百分数。 优点：可以测定细胞周期的总时间和各阶段的时间，结果明了易分析。 缺点：对细胞周期有影响；具有一定的危险性； 10 2.流式细胞仪测定法(Flow Cytometry)： 这种方法依据细胞各时期DNA含量的特征及其变化来确定细 胞周期时间。 优点：可测定各种细胞的周期时间，测定快速，结果可靠。 G1 G2 S 缩时摄像技术：可以得到 准确的细胞周期时间及分 裂间期和分裂期的准确时 间。 11 （Cell，Vol 132, 487-498, 2008，Asako Sakaue-Sawano, Atsushi Miyawaki） 利用荧光追踪细胞周期的新技术 。 蛋白质“Cdtl”只存在于G1 期，蛋白质“Geminin”只存 在于G1期之外的细胞周期其他 阶段。 Cdtl+红色荧光 G1期的细胞核标记为红色 Geminin+绿色荧光 S/G2/M期的细胞核标记 为绿色。 双色荧光探针 12 是指在自然过程中发生或经人为处理造成的细胞周期 同步化。前者称自然同步化，后者称为人工同步化。 1、天然同步化 natural synchronization ①多核体：如：粘菌、疟原虫。 ②某些水生动物的受精卵： 如海胆、海参、两栖类。 ③增殖抑制解除后的同步分裂： 如真菌的休眠孢子移入适宜环 境后，它们一起发芽，同步分裂。 三、 细胞同步化（synchronization） 受精卵早期卵裂 13 太岁 14 2.人工同步化 选择同步化 1）有丝分裂选择法：M期细胞与培养皿的附着性低，振荡脱 离器壁收集。用于单层贴壁生长细胞。 — 优点：操作简单，同步化程度高，细胞不受药物的伤害。 — 缺点：获得的细胞数量少。（分裂细胞约占1%～2%） 2）细胞沉降分离法：根