细胞生物学-陈威8 第八章 蛋白质分选与膜泡运输.pdfVIP

第八章 蛋白质分选与膜泡运输 1 主要内容 ? 第一节 细胞内蛋白质的分选 一、信号假说与蛋白质分选信号 二、蛋白质分选转运的基本途径和类型 三、蛋白质向线粒体、叶绿体和过氧化物酶体的分选 ? 第二节 细胞内膜泡运输 一、膜泡运输概观 二、COPII包被膜泡 三、COPI包被膜泡 四、网格蛋白/接头蛋白 五、膜泡与靶膜的锚定和融合 六、细胞结构体系的组装 2 第一节 细胞内蛋白质的分选 蛋白质寻靶(protein targeting)/蛋白质分选(protein sorting) 上万种蛋白如何被选择转运至细胞的特定部位？ 3 一、信号假说与蛋白质分选信号 ? George Palade 发现游离核糖体合成非分泌 蛋白，RER核糖体合成分泌蛋白 ? 1975，Blobel and Sabatini 提出信号肽 学说------分泌蛋白N端具有信号序列，该 序列指导其转移至内质网膜上合成。 ?1999，Blobel获得诺贝尔生理医学奖 4 5分泌性蛋白在 RER上合成 N端信号肽（signal sequence） 信号识别颗粒 （signal recognition particle, SRP） 停泊蛋白（docking protein） 分泌性蛋白在内质网上合成的决定因素： （1）信号肽（signal peptide） ? 位于蛋白质的N 端，一般由16～26 个残基组成 ? 包括疏水核心区、信号肽的C 端和N 端等3 部分 ? 原核细胞某些分泌性蛋白的N 端也具有信号序列 ? 无专一性 （2）信号识别颗粒（signal recognition particle, SRP） ? 由6 种不同的蛋白质和一个由300 个核苷酸组成的 7S RNA 结合组成 的一种核糖核蛋白复合体 SRP上有3个功能部位： 信号肽识别结合位点（P54） 翻译暂停结构域（P9/P14） DP结合位点（P68/P72） 6 （3）SRP受体——又称停泊蛋白（Docking protein,DP），是膜的整合蛋白， 存在于内质网上，可与SRP特异结合。 易位子——由3-4个Sec61蛋白复合体构成的一个类似于炸面圈的结构。 7 分泌性蛋白的合成与其共翻译转运 8 （4）膜整合蛋白的信号序列 ? 开始转移序列（start transfer sequence） ? 内在停止转移锚定序列 （internal stop-transfer anchor sequence, STA） ? 内在信号锚定序列 （internal signal anchor sequence, SA） 9 10 内质网整合膜蛋白的拓扑学特性 11 内在停止转移锚定 序列 内在信号锚定序列 12 ①信号序列（signal sequence）：存在于蛋白质一级结构上 的线性序列，通常15-60个氨基酸残基，有些信号序列在完 成蛋白质的定向转移后被信号肽酶（signal peptidase）切 除。 ②信号斑（signal patch）：存在于完成折叠的蛋白质中，构 成信号斑的信号序列之间可以不相邻，折叠在一起构成蛋白 质分选的信号。 13 二、蛋白质分选转运的基本途径与类型 共翻译转运途径 后翻译转运途径 14 ? 蛋白质的跨膜转运 细胞质基质?内质网，线粒体，叶绿体， 过氧化物酶体 ? 膜泡运输 RER?Golgi?膜泡转运 ? 选择性的门控转运 细胞质基质?核孔复合体; 核孔复合体?细胞质基质 ? 细胞质基质中蛋白质的转运 15 蛋白质分选转运方式 三、蛋白质向线粒体、叶绿体和过氧化物酶体的分选 16 （一）蛋白质从细胞质基质输入到线粒体 ? 蛋白质从细胞质基质 输入到线粒体基质 ? 蛋白质从细胞质基质 输入到线粒体内膜 ? 蛋白质从细胞质基质 输入到 线粒体膜间隙 17 （1）蛋白质从细胞质基质输入到线粒体基质 18 p p p （2）线粒体蛋白通过3 种 途径从细胞质基质输入到 线粒体内膜 19 p p （3）线粒体蛋白 通过两种途径从细 胞质基质输入到线 粒体膜间隙 20 （二）叶绿体基质蛋白与类囊体蛋白的靶向输入 ? 外膜蛋白 ? 内膜蛋白 ? 叶绿体基质蛋白 ? 类囊体膜蛋白 ? 类囊体腔蛋白 21 SRP依赖途径 pH依赖途径 22 （三）过氧化物酶体蛋白的分选 ? C端SKL(Ser-Lys-Leu)靶向序列 ? 可溶性细胞质受体 ? 过氧化物酶体膜受体 ? 信号序列不被切除 ? ATP水解 23 第二节 细胞内膜泡运输 膜流（membrane flow） 24 一、膜泡运输概观 ? 膜泡运输是蛋白运输的一种特有的方式，普遍存在于真核细胞中。在转运 过程中不仅涉及蛋白本身的修饰、加工和组装，还涉及到多种不同膜泡定 向运输及其复杂的调控过程。 ? 1、COPII有被