差异蛋白质组学在乳蛋白研究中的应用进展.pdfVIP

动物营养学报 2013 ， 25(8) :1683-1688 Chinese Joumal 01 Animal Nutrition doi:10.3969/j. issn.1006-267x.2013.08.004 差异蛋白质组学在乳蛋白研究中的应用进展 陈静廷1 ， 2 马 露1 杨晋辉1 张娟霞1 李发第2 卡登攀1 * (1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，动物营养学国家重点实验室，北京 I∞193; 2. 甘肃农业大学动物科学技术学院，兰州 73∞70) 摘 要:蛋白质组学是后基因时代的重要研究方向之一，有助于了解乳蛋白的组成、表达水平 及修饰状态等，在乳蛋白的研究中具有广泛的应用前景。而差异蛋白质组学是蛋白质纽学研究 的主要内容之一，可反映蛋白质的动态本质。本文主要就差异蛋白质组学在乳蛋白含量及组 分、疾病生物学标记的鉴定及乳蛋白热处理的变化等方面的研究进行综述。 关键词:差异蛋白质纽学;牛乳;乳蛋白 中图分类号 :Q51 文献标识码 :A 文章编号: 1006-267X( 2013) 08-1683 -06 乳蛋白是牛乳的重要组成成分之一，含有人 体所需的多种必需氨基酸且生物活性物质含量丰 富，具有较高的营养价值和多种潜在的生物学功 能，在维持人体健康方面具有重要作用。乳蛋白 的合成受到诸多因素的影响，致使乳蛋白的合成 及表达呈现出一定的差异。此外，蛋白质间还存 在复杂的相互作用，在执行生理功能时表现出多 样性、动态性[1] 。因此，传统的对单个蛋白质进行 研究的方式已无法满足后基因时代的要求。蛋白 质组学能够直观、整体地研究蛋白质的组成与调 控的活动规律，便于全面深入地了解蛋白质的表 达信息，近年来受到了广泛关注。本文主要从差 异蛋白质组学分析的角度，探讨蛋白质组学在乳 蛋白研究方面的应用，以期为相关研究提供一定 的参考。 1 乳蛋白的组成 牛乳成分复杂，营养价值极高，是人们生命活 动中重要的营养源之一。乳蛋白是牛乳的主要成 分之一，也是人类膳食蛋白质的重要来源。牛乳 中乳蛋白的含量为 3.0% -3.7% ，按结构、功能及 溶解性的不同主要分为 3 大类:酷蛋白 (CN) 、乳 收稿日期 :2013 -02 -01 清蛋白 (WP) 和乳脂球膜蛋白 (MFGM) 。酷蛋白 约占牛乳蛋白的 80% ，主要包括问-酷蛋白 (α51 - CN) ,xs2 -酷蛋白 (αs2-CN ) 、自-酷蛋白( ?-CN) 和 κ- 酷蛋白( K-CN) 。乳清蛋白主要组分包括 自-乳球蛋白(自-LG) 、α-乳白蛋白 (α-LA) 、血清 白蛋白( SA) 、乳铁蛋白( Lf)、免疫球蛋白 G (IgG) ，还存在多种小分子蛋白质，如酶类、金属结 合蛋白等低丰度蛋白质[2 -3] 。乳脂球膜蛋白包括 蒙古液蛋白 1 、黄瞟岭氧化酶、嗜乳脂蛋白、乳凝集素 及脂肪分化相关蛋白等，在常乳乳蛋白中的含量 仅为 1% -4% ，营养价值较低，但在初乳中含量较 高，在新生儿的防御机制及细胞生长过程中具有 重要作用[←5] 。乳中蛋白质种类多样，经过大量的 遗传变异和丰富的翻译后修饰，乳蛋白的组成变 得异常复杂、庞大[6] 。 2 蛋白质组学概述 蛋白质组学以蛋白质组为研究对象，在整体 水平上对复杂蛋白质混合物中动态变化的蛋白质 组成成分、表达水平与修饰状态进行同步、高通量 分析，以对测定成分进行检测、鉴定以及特性描 述，有助于了解蛋白质之间的相互作用与联系，从 基金项目十二五国家科技支撑计划 (2012BADI2B02 -?5) ;动物营养学国家重点实验室自主研究课题(2∞4DA125184Gll03 ) 作者简介:陈静廷(1987一) ，女，河北石家庄人，硕士研究生，研究方向为反鱼动物营养。 E-mail: chenjingting911@163.com *通讯作者:卡登攀，副研究员，硕士生导师，E-mail: burdenpan@gmail. com 1684 动物营养学报 25 卷 而认识生命活动的机理和疾病发生的分子机 制 [7 -9] 。蛋白质组学的研究内容主要涉及组成蛋 白质组学、相互作用蛋白质组学和差异蛋白质组 学[叫，其中差异蛋白质组学主要通过比较分析不 同状态或近似物种间蛋白质的表达图谱，实现对 体系内代谢调控的动态监测，从而揭示机体对内 外界环境变化产生反应的本质规律，能够反映蛋 白质的动态本质[ 11] 。蛋白质样品的制备、蛋白质 浓度测定、蛋白质分离、质谱分析、肤质量指纹图 谱的检索和蛋白质鉴定及生物信息学分析是蛋白 质组学研究的基本步骤，其关键技术主要包括高 通量的蛋白质分离技术、大规模的蛋白质鉴定技 术和生物信息学。目前最常用的蛋白质分离技术 有二维凝胶电泳(2-DE) 和液相分离技术[1