TGFβ1、wtp53基因在前列腺癌组织中的表达及其临床意义的论文.docVIP

　　TGFβ1、wtp53基因在前列腺癌组织中的表达及其临床意义的论文 【摘要】 目的 探讨tgfβ1、a and its clinical significances 　　su zhenbo，liang zuoent of urology，chinajapan union hospital of jilin university，changchun 130033，jilin，china 　　【abstract】 objective to detect the expressions of tgfβ1 and a and evaluate its significances.methods ethod al and carcinomous prostatic tissues.results tgfβ1 ilarly expressed in the normal and prostatic paraneoplastic tissues(pgt;0.05)，and so ous prostatic tissues pared al or paraneoplastic tissues(plt;0.01).the expressions of tgfβ1 or etastatic prostate carcinoma and nonmetastatic carcinoma(plt;0.01).concmusions tgfβ1 and alignant transformation and metastatis of prostate carcinoma.to detect the expressions of tgfβ1 and ay make for judging prostate cancer′s diagnosis and prognosis. 　　【key ed、丙烯酰胺、n，n二甲基双丙烯酰胺、dtt、pmsf购自美国sigma公司;depc 购自德国merk公司;其他常规化学试剂均为分析纯产品。 　　1.3 主要仪器 凝胶成像系统(上海天能科技有限公司);蛋白质电泳装置及转移系统(biorad，美国)。 　　1.4 g，分别加入500 μl蛋白裂解液，4℃，15 000 r/min匀浆后200 r/min离心15 min。上清移入另一管中，20 000 r/min离心60 min。弃上清，取沉淀重新悬浮于200 μl匀浆缓冲液中，加蛋白提取液，充分混匀，沸水加热变性10 min。应用蛋白分析试剂(biorad，usa)测定蛋白浓度。 　　1.4.2 sdspage电泳 配制sds聚丙烯酰胺凝胶，固定于电泳装置，加入tris甘氨酸电泳缓冲液，排除凝胶底部两玻璃板之间的气泡，向加样槽中加入各个样品(蛋白粗提液，含蛋白质40 μg)及蛋白标志物各25 μl，电压75 v，电泳30 min，然后120 v，1 h。电泳完毕后取出凝胶，用电转膜仪将蛋白质转移至硝酸纤维素膜，加封闭液封闭，室温2 h;加第一抗体，4℃温浴2 h;用250 ml tbst洗3次，每次10 min;加入第二抗体，室温1 h;用tbst洗涤3次，每次10 min;用dab显色。 　　1.4.3 半定量结果分析 利用天能图像分析系统对显色结果拍照，记录电泳条带净光密度和强度值，以目的基因与内参βactin比值确定其含量计算其表达的相对丰度。 　　1.5 统计学处理 计量资料以x±s表示，采用spss13.0统计软件进行组间的t检验。 　　2 结 果 　　2.1 免疫印迹结果 tgfβ1在相对分子量23 kd、tp53)蛋白，mtp53蛋白可抑制our suppressor p33ing1 cooperates oustakas a.actions of tgfbeta as tumor suppressor and prometastatic factor in human cancer〔j〕.biochim biophys acta，2007;1775(1)：2162. 　　3 shariat sf，kim jh，andrea levels of transforming groa〔j〕.cancer，2001;92(12)：298592. 　　4 丁国芳，李继承，徐银峰.前列腺癌nm23h1 mrna、tgfβ1 mrna表达及其与肿瘤转移、生存率的相关性研究〔j〕.分子生物学报，2006;39(6)：54452. 　　5 王 尧，王伟华，计国义，等.吉林地区超声引导经直肠前列腺活检513例报告〔j〕.中国老年学杂志，2008;28(19)：19267.