反相高效液相色谱法测定人参健脾片中橙皮苷的含量.docVIP

　　反相高效液相色谱法测定人参健脾片中橙皮苷的含量 【摘要】 目的采用反相高效液相色谱（RPHPLC）法测定人参健脾片中橙皮苷的含量。 方法 采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，以甲醇冰醋酸水（31∶4∶65）为流动相，流速1.0 ml·min-1，柱温35℃，检测波长283 nm。结果在0.228～2.592 μg之间，峰面积与进样量的线性关系为Y=1.0×106X－3.72×103，（r=0.999 6，n=6），平均回收率为98.53 %, RSD=0.87%（n＝6）。测得3批样品中橙皮苷的含量分别为1.38，1.36，1.35 mg/片。结论 所建方法简便、准确、重复性好，可用于人参健脾片的质量控制。 .L.编辑。 【关键词】 人参健脾片； 橙皮苷；反相高效液相色谱法 　　Determination of Hesperidi in Renshenjianpi Tablet by RPHPLC 　　SHANG Yuan hong， LIU Yuan ，TIAN Jin feng 　　1.Ethnic Pharmaceutical Institute of Southethod for determination of hesperidi from Renshenjianpi Tablet. Methods The column asil C18 (200 mm×4.6 mm,5 μm).The mobile phase consisted of methanolacetic acidl·min-1 and the UV detector at 283 nm. ResultsThe method shoples g ,1.36 mg ,1.35 mg respectively. ConclusionThis method is simple, reproducible and suitable for the determination of the contents of hesperidi in Renshen Jianpi Tablet . 　　Key asil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为甲醇冰醋酸水（31∶4∶65）；流速为1 ml·min-1，柱温35 ℃，检测波长为283 nm，进样量10 μl。橙皮苷峰与其他峰达到基线分离，峰形对称，橙皮苷峰与相邻峰分离度大于1.5，按橙皮苷峰计，色谱柱 理论 塔板数不低于3×103，色谱图见图1。按上述色谱条件，进对照品溶液、供试品溶液、三阴性对照溶液各10 μl，绘制色谱图。结果见图1。 　　2.2 对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品1.44 mg，置10 ml的容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得0.144 ml·min-1的对照品溶液。 　　2.3 样品溶液的制备取本品5片，除去包衣，研细，精密称定1.0 g，置平底烧瓶中，精密加入甲醇50 ml，密塞，称定重量，加热回流30 min，取出放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，静置取上清液微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液作供试品溶液。 　　2.4 缺陈皮、青皮、枳壳三阴性对照溶液精密称取缺陈皮、青皮、枳壳三阴性样品1.0 g，按供试品溶液的制备方法制得缺陈皮、青皮、枳壳三阴性对照溶液。 　　2.5 方法 学考察 　　2.5.1 线性关系的考察精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成不同浓度的对照品溶液，摇匀，作为对照品溶液，分别再按“2. 1”项色谱条件精密进样0.228，0.864，1.440 ，2.016，2.592 μg，测定峰面积。以峰面积（A）为纵坐标，进样量（C）为横坐标，进行线性回归，得回归方程：Y=1.0×106X－3.72×103，（r=0.999 6，n=6），橙皮苷对照品进样量在0.228～2.592 μg范围内与峰面积的线性关系良好。 　　2.5.2 精密度实验精密吸取同一对照品溶液，在上述同一色谱条件下，连续进样5次，每次10 μl，测定RSD＝0.42%（n＝5），表明精密度良好。 　　2.5.3 稳定性实验精密吸取供试品溶液在0，4，8，12，16 h分别进样，进行测定，结果其RSD＝0.36%，表明供试品溶液中橙皮苷在16 h内含量稳定。 　　2.5.4 重复性实验分别精密称取同一批号样品5份，按供试品溶液制备方法制备，依法进样测定，结果RSD＝0.29%（n＝5），表明本方法重复性良好。 　　2.5.5 回收率实验精密称取已知含量的样品0.5 g，6份，定量加入一定量的橙皮苷对照品，按供试品溶液制备方法制备，进样，测定， 计算 回收率。结果见表1。 　　2.5.6 样品测定