Wntβ-catenin信号通路在幼兔激素性股骨头缺血坏死模型中的表达及意义.pdfVIP

Wnt/β-catenin 信号通路在幼兔激素性股骨头缺血坏死模型中的 表达及意义 摘 要 目的：检测Caspase-3、Adipoq 、β-catenin、LRP5 、BMP-2 mRNA 在幼兔激素性股 骨头缺血坏死动物模型股骨头组织中的表达，探讨 Wnt/β-catenin 信号通路与幼兔激 素性股骨头缺血坏死的关系。 方法 ：选取8 周龄健康新西兰幼兔35 只，体重均在 1.1~1.9Kg 之间。随机分为激素 注射组 25 只，对照组 10 只。前者臀肌注射醋酸泼尼松龙（剂量标准7.5mg/kg ）， 一周2 次；后者注射等量的生理盐水，两组各注射8 周。分别于注射后4 、8 周末时 行双侧髋关节 X 线正位片、CT 检查，注射 8 周后全部实验动物予以处死并立即取 出双侧股骨头，一部分存于-80°冰箱用于RT-PCR 检测，另一部分制成蜡块用于病 理学检查。根据 X 线、CT 检查及病理学结果判断发病与否把激素注射组再分成发 病组和未发病组。用 RT-PCR 方法检测 Caspase-3 、 Adipoq 、β-catenin 、LRP5 、 BMP-2 mRNA 在各组股骨头中的表达情况，比较各相关基因在各组中的表达差异。 结果： 1.激素注射组动物中存活 22 只，6 只实验动物被认为发生股骨头坏死，未发 病16 只，实验组股骨头坏死发生率为27.3% （6/22 ）。 2.X 线及 CT 表现：在发病组中股骨头广泛骨质疏松，出现囊状透光区，囊状 透光区边缘模糊不清；表面轻度变扁，不同程度的塌陷；骨小梁界限模糊紊乱、存 在部分中断及坏死区。 3.组织病理学情况：激素组骨小梁排列稀疏，断裂较多，部分缺失；骨细胞数 目减少，核固缩；可见较多的脂肪细胞；骺板细胞不规则排列，核缺失较明显。 4.RT-PCR 显示：β-catenin 在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为 0.22 ±0.01、0.35 ±0.09、1.07±0.41，发病组与未发病组、对照组比较，差异有统计 学意义 （t=4.94,10.60,P0.05 ）；LRP5 在发病组、未发病组、对照组的相对表达量 分别为0.22 ±0.05、0.35 ±0.12、1.12±0.36，发病组与未发病组、对照组比较,差异 有统计学意义 （t=4.39, 9.93, P0.05 ）；Adipoq 在发病组、未发病组、对照组的相对 2 表达量分别为17.84±5.51、3.33 ±1.26、1.11±0.27，发病组与未发病组、对照组比 较，差异有统计学意义（ t=5.88, 12.01, P0.05 ）；Caspase-3 在发病组、未发病 组、对照组的相对表达量分别为3.10 ±0.90、1.29±0.35、1.06±0.24，发病组与未 发病组、对照组比较，差异有统计学意义 （t=7.15, 7.75 , P0.05 ）。BMP-2 在发病 组、未发病组、对照组的相对表达量分别为0.08 ±0.05、0.31 ±0.21、1.12±0.32， 发病组与未发病组、对照组比较，差异有统计学意义 （t=2.93, 8.08, P0.05 ）。 在对照组、未发病组及发病组中，β-catenin 与 LRP5 的表达均呈正相关关系 （r=0.779, 0.914, 0.885, P=0.008,0.020,0.019 ）；Caspase-3 与β-catenin 呈负相关关系 （r=-0.782 , -0.839 , -0.838, P=0.008,0.022,0.026 ）；Caspase-3 与LRP5 呈负相关关系 （r=-0.769, -0.863 , -0.878 , P=0.009,0.032,0.022）；Adipoq 与β-catenin 呈负相关关系 （r=-0.733 , -0.702, -0.736, P=0.016,0.006,0.036 ）；Adipoq 与 LRP5 呈负相关关系 （r= -0.749, -0.607, -0.756 , P=0.013,0.023,0.043 ）；BMP-