原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
硫代磷酸酯类杀虫剂ScFv抗体库的构建与初步筛选.pdf
~此，t. .Jl ~ ð且， 2014 ， 23(4):202-206
Acta Agγicultuγae Boγeαli-occidentalis Sinica doi: 10.7606/j.issn.1004-1389.2014.04.033
网络出版时间:2014-04-25
网络出版地址:/kcms/ doi/10. 7606/j. issn. 1004-1389.2014.04.033. html
硫代磷酸醋类杀虫剂 ScFv 抗体库的构建与初步筛选
寇立泉，刘 爽，王东方，祁志军
(西北农林科技大学农药研究所，陕西杨凌 712100)
摘 要 旨在构建硫代磷酸酶类杀虫剂单链抗体(ScFv) 库，并对其进行初步筛选。采用 RT-PCR 法从牛血
清蛋白(BSA)人工抗原免疫的 Balb/C 小鼠脾细胞中克隆出 V V PCR 方法将V
和 基因，通过重叠延伸 和
H L
H
V 基因拼接在一起，构建 ScFv 基因，与表达载体 pCANTAB 5E 连接后，在大肠杆菌中诱导表达。采用亲和
L
富集法，经 6 轮淘筛后用酶联免疫吸附分析(ELISA) 测定其活性。得到滴度为 2.2 X 106 pfu/mL 噬菌体库，
ELISA 检测呈阳性。说明成功表达并筛选得到鼠源抗硫代磷酸酶类杀虫剂 ScFv 抗体库。
关键词 硫代磷酸醋类杀虫剂g 单链抗体库; ELISA
中图分类号 S481 文献标志码 A 文章编号 1004-1389(201的04-0202-05
Construction and Preliminary Screening of a Single Chain Variable
Fragment Library against Thio-phosphate Pesticides
KOU Liquan , L1U Shuang , WANG Dongfang and Q1 Zhijun
(lnstitute of Pesticide Research , Northwest AF University , Yangling Shaanxi 712100. China)
Abstract To construct and preliminarily screen a singe chain variable fragment antibody (ScFv) li
brary against thio-phosphate pesticides. V H and VL genes were cloned from the spleen cells of the
Balb/C mouse , which was immunized by generic hapten of thio-phosphat巳 pesticides conjugated to bo-
vine serum albumin (BSA). ScFv gene was spliced by sequence overlap extending PCR , and then it
was ligated into pCANT AB 5E vector. The recombinant plasmid was transformed into E. coli and
ScFv was induced by IPTG. After six rounds of
文档评论（0）