兔免疫血清特异性IgG的初步分离纯化的教学实验设计.pdfVIP

临床和实验医学杂志 圆园员员 年怨 月 第员园卷 第员愿期 员源·愿苑 · 兔免疫血清特异性陨早郧 的初步分离纯化的教学实验设计 医学教育 武永红 曹励民（西安医学院医学技术系 陕西 西安 苑员园园圆员） 【摘要】 目的 将血清特异性陨早郧的分离纯化与纯度鉴定实验用于医学院本科实验教学。方法 设计家兔特异 性免疫血清经硫酸铵盐析，再通过杂藻责澡藻凿藻曾郧原圆缘凝胶过滤层析，将分离前后的样品分别配制成相同蛋白浓度，分别进 行玻片凝集试验和试管凝集试验。结果 玻片凝集法分离后的样品凝集现象强于分离前；试管凝集法分离后的样品凝 集效价大于分离前。结论 成功得到初步分离纯化的特异性陨早郧。实验操作较为简便，结果稳定，再现性好。通过本实 验学生能更好地理解免疫球蛋白的制备、分离纯化的基本方法和过程。 【关键词】实验教学 免疫血清 凝胶过滤层析 粤栽藻葬糟澡蚤灶早耘曾责藻则皂蚤藻灶贼燥灶责则藻造蚤皂蚤灶葬则赠泽藻责葬则葬贼蚤燥灶葬灶凿责怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶燥枣贼澡藻泽责藻糟蚤枣蚤糟陨早郧枣则燥皂贼澡藻蚤皂皂怎灶藻凿砸葬遭遭蚤贼泽泽藻则怎皂援 宰哉再燥灶早原 澡燥灶早，悦粤韵蕴蚤原皂蚤灶，酝藻凿蚤糟葬造贼藻糟澡灶燥造燥早赠凿藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣载蚤鸳葬灶皂藻凿蚤糟葬灶糟燥造造藻早藻援 【粤遭泽贼则葬糟贼】 韵遭躁藻糟贼蚤增藻 粤责责造赠蚤灶早泽藻责葬则葬贼蚤燥灶，责怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶葬灶凿蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶燥枣泽责藻糟蚤枣蚤糟陨早郧枣则燥皂泽藻则怎皂贼燥怎灶凿藻则早则葬凿怎葬贼藻贼藻葬糟澡蚤灶早藻曾责藻则蚤鄄 皂藻灶贼援酝藻贼澡燥凿泽 阅藻泽蚤早灶贼澡葬贼泽责藻糟蚤枣蚤糟葬造造赠蚤皂皂怎灶藻凿则葬遭遭蚤贼泽藻则怎皂，贼澡则燥怎早澡泽怎造枣葬贼藻，杂藻责澡藻凿藻曾郧原圆缘早藻造枣蚤造贼藻则蚤灶早糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠泽藻责葬则葬贼蚤燥灶，则藻泽责藻糟鄄 贼蚤增藻造赠皂葬噪藻早燥贼贼藻灶泽葬皂责造藻泽葬灶凿怎灶泽藻早则藻早葬贼藻凿燥灶藻泽蚤灶贼燥贼澡藻泽葬皂藻糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶，贼葬噪藻泽造蚤凿藻泽葬早早造怎贼蚤灶葬贼藻藻曾责藻则蚤皂藻灶贼葬灶凿贼怎遭藻泽葬早早造怎贼蚤灶葬贼藻藻曾责藻则蚤皂藻灶贼援 砸藻泽怎造贼泽 栽澡藻葬早早造怎贼蚤灶葬贼藻责澡藻灶燥皂藻灶燥灶燥枣泽葬皂责造藻泽葬枣贼藻则泽藻责葬则葬贼蚤燥灶蚤泽藻灶增蚤凿藻灶贼藻则贼澡葬灶怎灶泽藻早则藻早葬贼藻凿燥灶藻泽；贼澡藻贼蚤贼藻则燥枣泽葬皂责造藻泽葬枣贼藻则泽藻责葬则葬贼蚤燥灶早则藻葬贼藻则 贼澡葬灶怎灶泽藻早则藻早葬贼藻凿燥灶藻泽援悦燥灶糟造怎泽蚤燥灶 杂怎糟糟藻泽泽枣怎造造赠早藻贼责则藻造蚤皂蚤灶葬则赠责怎则蚤枣蚤藻凿泽责藻糟蚤枣蚤糟陨早郧援 耘曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造燥责藻则葬贼蚤燥灶蚤泽灶燥贼糟燥皂责造藻曾，贼澡藻则藻泽怎造贼泽葬则藻泽贼葬鄄 遭造藻，则藻责则燥凿怎糟蚤遭蚤造蚤贼赠援 栽澡则燥怎早澡贼澡藻藻曾责藻则蚤皂藻灶贼泽贼怎凿藻灶贼泽糟葬灶遭藻贼贼藻则怎灶凿藻则泽贼葬灶凿贼澡藻责则藻责葬则葬贼蚤燥灶泽藻责葬则葬贼蚤燥灶葬灶凿责怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶燥枣蚤皂皂怎灶燥早造燥遭怎造蚤灶，葬灶凿 贼澡藻蚤则遭葬泽蚤糟皂藻贼澡燥凿葬灶凿责则燥糟藻泽泽援 【运藻赠憎燥则凿泽】 耘曾责藻则蚤皂藻灶贼贼藻葬糟澡蚤灶早；陨皂皂怎灶藻泽藻则怎皂；郧藻造责藻则皂藻葬贼蚤燥灶悦澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠； 通常不与物质发生 兔血清于管中，逐滴加入饱和硫酸铵溶液圆援园皂造。室温 杂藻责澡藻凿藻曾系列凝胶为惰性载体， 化学反应，且不会因吸附杂质造成层析柱堵塞，对温度 静置员园皂蚤灶，猿园园园则辕皂蚤灶离心 员园皂蚤灶，用移液器小心吸 和缓冲液的环境要求比较宽。使用过的凝胶通过简单 出上层清液（主要含白蛋白）。沉淀用园援缘皂造 的蒸馏水 ［猿］ 的处理便可回收再利用，节省了教学资源。凝胶层析的 溶解 。 用途有脱盐、分离提纯多种物质（如酶、蛋白质、氨基酸、 员援圆援圆 杂藻责澡藻凿藻曾郧原圆缘凝胶柱层析［源 ］ 多糖、激素、生物碱等）、高分子溶液的浓缩。其中，凝胶 员援圆援圆援员 凝胶的溶胀 称取 杂藻责澡藻凿藻曾郧原圆缘员早置于锥 层析在蛋白质纯化的生物技术领域得到广泛的应用，随 形瓶中，加蒸馏水约猿园皂造，在室温浸泡溶胀至少猿澡后装 着免疫蛋白类制剂在临床上和生活中的应用价值逐渐 柱，或在沸水浴中煮沸员澡，取出冷至室温后再