南方新课堂高考生物总复习专题1、4 基因工程、生物技术的安全性和伦理问题课件 新人教版选修3.pptVIP

3.基因的运输工具——载体。 (1)作用： ①作为运载工具，将目的基因送入宿主细胞中。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 (2)载体必须具备三个条件： ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。 ②有多个限制酶切位点，以便与目的基因连接。 ③具有某些标记基因，以便进行筛选。 (3)种类： ①细菌质粒：细菌拟核 DNA 以外的小型环状 DNA。 ②λ噬菌体的衍生物和某些病毒的 DNA。 * 几种酶的作用部位 (1)作用于①部位的酶：限制酶、DNA 连接酶、DNA 聚合 酶、Taq 酶。 (2)作用于②部位的酶：DNA 解旋酶。 * 限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ PstⅠ 识别序列和 切割位点 ↓ GGATCC CCTAGG ↑ ↓ GAATTC CTTAAG ↑ ↓ CTGCAG GACGTC ↑ 【典例】下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割 的位点。如下图所示，已知某 DNA 在目的基因的两端 1、2、3、 4 四处有 BamHⅠ或 EcoRⅠ或 PstⅠ的酶切位点。现用 BamHⅠ 和 EcoRⅠ两种酶同时切割该 DNA 片段(假设所用的酶均可将识 别位点完全切开)，下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后 单个含目的基因的 DNA 片段自身连接成环状的是( ) * A.1 为 BamH Ⅰ，2 为 EcoR Ⅰ，3 为 BamH Ⅰ，4 为 Pst Ⅰ B.1 为 EcoR Ⅰ，2 为 BamH Ⅰ，3 为 BamH Ⅰ，4 为 Pst Ⅰ C.1 为 Pst Ⅰ，2 为 EcoR Ⅰ，3 为 EcoR Ⅰ，4 为 BamH Ⅰ D.1 为 BamH Ⅰ，2 为 EcoR Ⅰ，3 为 Pst Ⅰ，4 为 EcoR Ⅰ * [解析](1)提取隐含信息：①酶切后单个含目的基因的 DNA 片段的两个黏性末端如果是相同的，则能自身连接成环状；② 要切下单个含目的基因的 DNA 片段，必须在 2、3 位点上切割。 (2)分析选项：用BamHⅠ和 EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA 片段，当 2 为 EcoRⅠ，3 为BamHⅠ，切下的单个含目的基因 的 DNA 片段的两个黏性末端不相同，不能自身连接成环；B、 C 项的 2、3 位点的限制酶一样，切下的 DNA 片段的黏性末端 相同；D 项在 3 位点处是 PstⅠ切割位点，题目中没有要求用此 酶进行切割。 [答案]A * 【举一反三1】(2013年广东)地中海贫血症属于常染色体遗传病。一对夫妇生有一位重型β地中海贫血症患儿，分析发现，患儿血红蛋白β链第39位氨基酸的编码序列发生了突变(C→T)。用PCR扩增包含该位点的一段DNA片段l，突变序列的扩增片段可用一种限制酶酶切为大小不同的两个片段m和s；但正常序列的扩增片段不能被该酶酶切，如下图1。目前患儿母亲再次怀孕，并接受了产权基因诊断。家庭成员及胎儿的PCR扩增产物酶切电泳带型示意图见图2。(终止密码子为UAA、UAG、UGA。) * 图 1 图 2 * (1)在获得单链模板的方式上，PCR 扩增与体内 DNA 复制 不同，前者通过______________解开双链，后者通过__________ 解开双链。 (2)据图分析，胎儿的基因型是______(基因用 A、a 表示)。 患儿患病可能的原因是_______________的原始生殖细胞通过 ______________过程产生配子时，发生了基因突变；从基因表 达水平分析，其患病是由于_______________________________ _________________。 * (3)研究者在另一种贫血症的一位患者β链基因中检测到一 个新的突变位点，该突变导致β链第 102 位的天冬酰胺替换为苏 氨酸。如果________________，但________________________， 则为证明该突变位点就是这种贫血症的致病位点提供了一个有 力证据。 * [解析](1)PCR 是体外扩增 DNA 的方式，通过高温使双链解 开，体内 DNA 的复制则是通过解旋酶使 DNA 双链解开。 (2)由题意可知重度β地中海贫血是隐性遗传病，突变后的 序列可以被剪切成 m 和 s 的两个片段，而正常序列无法被剪切， 因此母亲、父亲、患儿和胎儿的基因型分别为：AA、Aa、aa 和 Aa，母亲和父亲的基因型为 AA 和 Aa，生下患儿可能是因 此母亲的原始生殖细胞通过减数分裂产生配子时发生了基因突 变。由图可知，其突变为由模板链的GTC 突变成ATC，mRNA 上由 CAG 变成 UAG，因此终止密码子提前