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血液中乙醇含量的色谱法测定 　　【摘要】 目的：建立一种简便、快速、准确、可靠的顶空气相色谱法对血中乙醇进行定性、定量分析。方法：采用顶空进样器，利用气体对挥发性物质的萃取原理进行样品前处理，叔丁醇为内标物，气相色谱仪进行分离分析，用保留时间定性，内标标准曲线法定量。结果：该方法线性范围为0.2～2.0 mg/ml，方法回收率为100.21%，最低检测限（the lowest limit of detection，LLOD）为0.01 mg/ml。结论：该方法可用于法医毒物分析血中乙醇的检测及实验室能力认可中能力验证计划样品的测定，结果令人满意 【关键词】 法医毒物分； 顶空气相色谱法； 血液； 乙醇 中图分类号 R595.6 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2016）22-0052-02 doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2016.22.026 我国交通法规定，驾驶员血液中乙醇浓度大于或者等于0.2 mg/ml，小于0.8 mg/ml的驾驶行为为酒后驾车，乙醇浓度大于或者等于0.8 mg/ml的驾驶行为为醉酒驾车[1-2]。“酒驾”、“醉驾”是当前道路交通事故的主要肇事原因之一。本文在参考大量文献的基础上[3]，对双柱双检测器顶空气相色谱法进行了探索，并取得了满意的结果，现报道如下 1 材料与方法 1.1 仪器和试剂 俊齐GC2002气相色谱仪；顶空自动进样器（HS-16A）；乙醇标准溶液（2.0 mg/ml，购自司法部司法鉴定科学技术研究所）；叔丁醇（色谱纯）。待测样品：CNAS Z0039样品1；CNAS Z0039样品2 1.2 实验方法 1.2.1 溶液配制 乙醇标准储备液：用2.0 mg/ml逐级稀释为浓度1.6、1.2、1.0、0.8、0.4、0.2 mg/ml的乙醇标准储备液系列。内标叔丁醇溶液：在十万分之一电子天平上准确称取一定量的叔丁醇（色谱纯）放入100 ml容量瓶中，用蒸馏水定容到刻度，使其浓度为4 mg/ml，作为叔丁醇储备液；准确移取一定量上述叔丁醇储备液放入250 ml容量瓶中，用蒸馏水定容到刻度，使其浓度为40 μg/ml，得内标叔丁醇标准溶液 1.2.2 顶空气相色谱条件 俊齐GC2002顶空气相色谱仪：001通道色谱柱，DB-ALC2（30 m×0.32 mm×1.2 μm），002通道色谱柱；DB-ALC1（30 m×0.32 mm×1.8 μm）；柱温40 ℃恒温；载气N2流速8 ml/min；进样口温度150 ℃，检测器温度250 ℃，加热箱温度65 ℃，定量环温度105 ℃，传输线温度110 ℃；气相循环时间3.5 min，样品瓶加热平衡时间10.0 min，样品瓶加压时间0.10 min，定量环充满时间0.10 min，定量环平衡时间0.05 min，进样时间1.00 min 1.2.3 定性分析 取空白全血两份，一份为0.2 ml于20 ml顶空瓶内，加入1.0 ml内标叔丁醇，盖上橡胶垫及铝封，用顶空钳密封，充分混匀后，为空白对照样品；另一份为0.196 ml于20 ml顶空瓶内，加入0.04 ml乙醇标准溶液（2.0 mg/ml）及1.0 ml内标叔丁醇，盖上橡胶垫及铝封，用顶空钳密封，充分混匀后，为乙醇标准对照样品；在1.2.2色谱条件下，用顶空进样器进样，进行气相色谱分析。空白样品作为阴性对照；乙醇标准对照样品作为阳性对照；为待测样品中乙醇定性分析的依据。精确移取待测样品全血0.2 ml各4份于20 ml顶空瓶内，加1.0 ml内标叔丁醇，盖上橡胶垫及铝封，用顶空钳密封，充分混匀后，样品为：CNAS Z0039样品1-1、CNAS Z0039样品1-2、CNAS Z0039样品1-3、CNAS Z0039样品1-4、CNAS Z0039样品2-1、CNAS Z0039样品2-2、CNAS Z0039样品2-3、CNAS Z0039样品2-4，在1.2.2色谱条件下，用顶空进样器进样，进行气相色谱分析 1.2.4 定量分析 把1.2.3所得CNAS Z0039样品1-1、CNAS Z0039样品1-2、CNAS Z0039样品1-3、CNAS Z0039样品1-4、CNAS Z0039样品2-1、CNAS Z0039样品2-2、CNAS Z0039样品2-3、CNAS Z0039样品2-4，在1.2.2色谱条件下，用顶空进样器进样，进行气相色谱分析。分别精确移取0.2 ml乙醇标准储备液（2.0、1.6、1.2、1.0、0.8、0.4、0.2 mg/ml，每个浓度点平行配制两个样品）于20 ml顶空瓶内，分别加入1.0 ml内标叔丁醇，盖上橡胶垫及铝封，用顶空钳密封，充分混匀后，配制成