酶第二章酶作用基本原理第二节.pptVIP

酶工程 ? 酶促反应动力学 酶的作用机理 酶作用的调节机理 同工酶 酶的作用机理 酶为什么具有高度的专一性和巨大的催化效率? 酶的专一性和高效性是酶的两个基本特性。 抑制 专一性：一般是指酶对底物结合能力的大小。 高效性：是指酶催化反应速度的快慢。 酶的专一性和高效性密切相关。某些抑制剂与酶结合的解离常数很小，但并不起反应；有些金属离子也能催化一些反应却无专一性。 一、酶专一性机理（一）、酶的活性中心 酶的活性中心（Active Site or Active center): 指酶分子中能直接结合底物，并催化底物发生反应的部位。 酶的活性中心： 结合部位（binding site): 负责酶与底物的结合，决定酶的专一性。 催化部位（catalytic site)： 参与酶的催化作用，决定催化能力的大小。 对于简单蛋白质的酶（不需要辅因子），多肽链上的某几个氨基酸残基或这些残基的某些基团组成了酶的活性中心。 对结合蛋白的酶，除了某些氨基酸外，辅因子也参与组成活性中心。 构成酶活性中心的这些基团，它们在酶蛋白的一级结构上相距可能较远，甚至不在一条多肽链上，但由于多肽链的折叠、盘曲形成高级结构后，使它们彼此靠近，形成具有一定空间位置的结构区域。这个区域不但具有三维结构，而且一般处在酶分子表面的一个疏水凹穴内。 必需基团：酶活性中心的基团，占据酶分子很小部分。 酶分子的其他部分对维持酶的三维结构是必需的，有的与免疫有关，有的与专一性有关。 （二）、模板或锁与钥匙学说 1980年E.Fisher曾用“模板”或称“锁与钥匙”学说（lock and key theory)来解释酶作用的专一性，认为底物分子或底物分子的一部分像一把钥匙，酶的活性中心像把锁，就像钥匙与锁那样的工作着。 就是说底物分子上发生反应的部位专一性地契入到酶活性中心部位，二者具有紧密互补的关系。 该学说能很好地解释酶的立体异构专一性，但不能解释酶的活性中心既适合于可逆反应的底物又适合于可逆反应的产物，而且也不能解释酶专一性中的反有现象。 （三）、诱导契合学说 1964年Koshland提出了诱导契合学说（induced-fit hypothesis): 当酶分子与底物分子接近时，酶蛋白受到底物的诱导，其构象发生有利于底物结合的变化，酶与底物在此基础上互补契合，进行反应 诱导契合学说的中心思想归纳起来有以下几点： 1、酶有其原来的形状，它一定一开始就是底物的模板。 2、底物能诱导酶的形状发生一定的变化 3、当酶形状发生变化以后，就能使其中的基团形成正确的排列； 4、在酶反应过程中活性中心的这种构象的变化是可逆的，当它与底物结合时被诱导生成一种新的构象，而当反应结束并且产物从酶分子表面脱落下来时，又恢复了原来的构象。 二、酶促反应的过渡态 在一个化学反应开始时，反应物分子的平均能量水平很低，视为初态。 在反应的一瞬间，反应物分子相撞，忽然有了比初态高的能量，视为过渡态（transition state)或称活化态（activated state)， 而高出的一部分能量即为活化能（activation energy). 活化态释放出一部分能量,调整分子中的一些组成,即变为产物P,视为终态. 在没有催化剂的情况下,由初态到终态,要越过活化态这个能障,常常需要很高的活化能,所以常需要加温、加压或进行光照以增加能量，才能发生反应，在有催化剂的情部下，因催化剂能降低反应的自由能，只要较小的能量就可以使反应物进入活化态，成为活化分子，所以和非催化反应相比，活化分子数大大增加，从而加快了反应速度。 催化剂不能改变反应前后的自由能差，但能降低活化自由能，所以催化剂能增加反应速度，但不能改变反应平衡。 三、中间产物学说 酶如何通过改变反应过程使反应的活化能降低？ 中间产物学说。 活性部位 该学说认为，酶E在催化反应时，首先与底物S结合形成ES复合物（ES-complex)，再由这个不稳定的ES复合物分解释放出产物P和原来的酶，即： E+S ＝ ES → E+P 在反应中，E与S通过某种方式结合形成ES时，由于E与S的结合动摇了底物分子内某些化学键使之呈不稳定状态，从而降低了活化能。然后ES复合物还可转变为酶与产物的复合物EP，继而EP分解出P和E。 过氧化物酶催化反应： H2O2+AH2 A+2H2O AH2为供氢体， 此酶为一铁卟啉蛋白，在波长645、583、548、498nm处有四条吸收光带。 当加入H2O2，在波长561、530.5nm下两条新吸