开放阅读框及基因识别.pdf

——06生信黄鑫章2006062114 Ø开放阅读框 （ORF，openreading frame） Ø基本思路 Ø实现方法 Ø举例 ORF ☼ORF(openreadingframe) 是一个没有终止编码的密码子序列。 对于任何给定的核酸序列 （单链DNA或 mRNA），根据密码子的起始位置，可以按照 3种方式解释。 • 例如，对于序列ATTCGATCGCAA,一种可 能的密码子阅读顺序为ATT、CGA、 TCG、CAA，另外两种可能的密码子阅读 顺序分别为A、TTC、GAT、CGC、AA和 AT、TCG、ATC、GCA、A。这三种顺序 被称为阅读框 （ORF,openreadingframe) 基本思路 ☼找到一比较长的序列，其相应的密码子序 列不含终止密码子，那么这段序列可能就 是编码区域 实现方法 ① 扫描给定的DNA序列，在3个不同的阅读 框中寻找较长的ORF ② 当遇到终止密码子后，回头寻找起始密码 子，以确定完整的编码区域 举例 • 胰岛素由A、B两个肽链组成。人胰岛素 (InsulinHuman)A链有11种21个氨基酸，B 链有15种30个氨基酸，共16种51个氨基酸 组成 • NM_000207 ORF预测的可靠性 • 密码子第3碱基趋向于相同的几率是否远大 于仅仅由随即产生的几率 • 分析ORF中的密码子是否与那些用于同一 生物其他基因中的密码子相一致 • 将ORF翻译成氨基酸序列，然后将结果序 列与序列数据进行比较，如果发现1个或多 个显著相似序列，则所预测ORF的可信度 较高 • 胰岛素由A、B两个肽链组成。人胰岛素 (InsulinHuman)A链有11种21个氨基酸，B 链有15种30个氨基酸，共16种51个氨基酸 组成 • 其中A7(Cys)-B7(Cys)、A20(Cys)-B19(Cys) 四个半胱氨酸中的巯基形成两个二硫键， 使A、B两链连接起来。此外A链中A6(Cys) 与A11(Cys)之间也存在一个二硫键。 • 在B细胞的细胞核中，第11对染色体短臂上胰岛 素基因区DNA向mRNA转录，mRNA从细胞核移 向细胞浆的内质网，转译成氨基酸相连的长 肽——前胰岛素原 （Proinsulin)，前胰岛素原经 过蛋白水解作用除其前肽，生成胰岛素原。胰岛 素原随细胞浆中的微泡进入高尔基体，由86(84) 个氨基酸组成的长肽链——胰岛素原在高尔基体 中经蛋白酶水解生成胰岛素及C肽，分泌到B细胞 外，进入血液循环中。未经过蛋白酶水解的胰岛 素原，一小部分随着胰岛素进入血液循环，胰岛 素原的生物活性仅及胰岛素的5%。