β甘露聚糖酶的研究进展及其在猪营养中的应用.pdfVIP

B一甘露聚糖酶的研究进展及其 在猪营养中的应用 史宝军 (广东溢多利生物科技股份有限公司，广东省饲料添加剂生物工程 技术研究开发中心，珠海519060) 摘要p一甘露聚搪酶是降解甘露聚糖类物质的关键酶。本文综述了B一甘露聚糖酶的生产、酶学性质及 其在猪营养中的应用。 关键词B一甘露聚糖酶生产酶学一眭质猪营养应用 型甘露糖苷键，其作用底物包括甘露聚糖、半乳甘露聚糖、葡萄甘露聚糖和半乳葡萄甘露聚糖。B一 甘露聚糖酶能将广泛存在于豆类籽实中的甘露聚糖等多糖降解为葡萄糖、甘露寡糖等低聚糖，不仅消 除了甘露聚糖对单胃动物各种营养素的抗营养作用，同时生成的甘露低聚糖在动物生产中起着重要的 作用。近年来随着饲用酶制剂在饲料工业和养殖行业中得到普遍重视，B一甘露聚糖酶作为玉米／豆 粕型日粮最有效的饲用酶制剂，其研究和应用进入了一个新阶段。 l B一甘露聚糖酶的生产 8一甘露聚糖酶的来源非常广泛，包括植物、细菌、真菌、放线菌甚至软体动物，其中微生物来 源的B一甘露聚糖酶具有酶活高、成本低、提取方便、酶作用范围广、底物专一性等显著特点，已在 工业化生产和理论研究中得到广泛的应用。国内外对B一甘露聚糖酶生产的研究涉及产酶菌株的选 育、发酵条件的优化、酶的纯化、基因克隆表达以及活性位点等方面。 1．1微生物生产 我国自20世纪80年代以来开展微生物B一甘露聚糖酶技术研究，已经取得了很大的进展，主要 集中在枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌、黑曲霉和诺卡氏菌形放线菌等产酶菌株的研究 上。柴萍萍等对芽孢杆菌WY45的培养基进行了优化，发酵96h内粗酶液蛋白质浓度和酶活性持续升 高，并均在96h时达到最大值0．68吲Inl和2800u／1Ill…；李剑芳等通过筛选和紫外线诱变，获得了 u％面iY1上01278，经固态培养后其最高 一株遗传性状稳定的酸性B一甘露聚糖酶高产菌株Aspergillus 酶活可达3 B一甘露聚糖酶的新菌种”]。1995年美国ChemGen公司利用菌种Baenluslenhl8发酵生产p一甘露聚 糖酶。开发用作饲料添加剂，是目前美国销量最大的饲用酶制剂。 B一甘露聚糖酶～般以胞外诱导酶的形式存在于生物体，只有很少的以结构酶形式存在，对于大 部分产B一甘露聚糖酶的微生物，在培养基中添加少量的甘露聚糖，如甘露聚糖、槐豆胶或其水解 niger 物，就能极大提高产酶水平。台湾科研者以脱脂椰子肉作为碳源进行Aspe蟛umNcH一189发 酵，产酶活力提高了4倍H】。但有时一些半纤维素类物质或苯酚类化合物也能有效增加p一甘露聚糖 m_ 酶的分泌水平，如在培养基中添加微量的阿魏酸及香草酸，能有效提高分解木质素的真菌Plllebia Fiv0 diate 79的8一甘露聚糖酶产量”1。 ·546· 饲料董养价值评价与添加剂研究 1．2基因克隆 随着生物技术的发展和进步，微生物B一甘露聚糖酶的研究工作逐渐向分子生物学深入进行，通 过构建高表达工程菌以得到高产菌株；同时对B一甘露聚糖酶基因的表达和酶合成调节控制进行研 究，以提高酶蛋白的产量。 来源的B一甘露聚糖酶基因分别在原核表达系统和真核表达系统中进行了表达。如嗜碱芽孢杆菌、极 端嗜热厌氧菌、荧光假单孢菌、变青链霉菌以及里氏木霉等微生物来源的基因，在大肠杆菌中表达成 功，并具有生物活性”1；如将AsPe晒uus”·deal一克隆的B一甘露葡聚糖酶基因在酿酒酵母中实现了 su伍n 重组表达”’，T舳g等(2001)用毕赤酵母表达来源于Ag删cu8bi8pomBc54一cad)8的甘露聚糖 酶基因eel4，表达量提高了3倍”1。陈小兵等以里氏木霉(THchoderInareesei)RNA为模板，