中国药典版微生物基本知识-培训课件.pptVIP

1101 无菌检查法-培养基的适用性检查 本检查可在供试品的无菌检查前或与供试品的无菌检查同时进行。 1、无菌性检查 每批培养基随机取不少于五支（瓶），置各培养基规定的温度培养14天，应无菌生长。 2、灵敏度检查---培养基灵敏度检查所用菌株传代次数不得超过5代。 2010年版 2015年版 1、硫乙醇酸盐流体培养基 金黄色葡萄糖球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭军(4种） 2、改良马丁培养基 白色念珠菌、黑曲霉（2种） 1、硫乙醇酸盐流体培养基 金黄色葡萄糖球菌、铜绿假单胞菌、生孢梭军(3种） 2、胰酪大豆胨肉汤培养基（TSB) 枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉（3种） 将枯草芽孢杆菌移到TSB灵敏度检查中，能够确保在两种培养基中需气菌都能够生长 1101 无菌检查法-培养基灵敏度检查 菌液制备用培养基变化 2010年版 2015年版 金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌新鲜培养物接种至 营养肉汤培养基或 营养肉汤琼脂培养基 胰酪大豆胨肉汤培养基或 胰酪大豆胨琼脂培养基 生孢梭菌 新鲜培养物接种至 硫乙醇酸盐流体培养基 硫乙醇酸盐流体培养基 白色念珠菌 新鲜培养物接种至 改良马丁培养基或 改良马丁琼脂培养基 沙氏葡萄糖肉汤培养基或 沙氏葡萄糖琼脂培养基 黑曲霉 新鲜培养物接种至 改良马丁琼脂斜面培养基 沙氏葡萄糖琼脂培养基 12ml的硫乙醇酸盐流体培养基7支，分别接种小于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌各2支，另1支不接种作为空白对照，培养3天。 9ml的胰酪大豆胨液体培养基7支，分别接种小于100cfu的枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接种作为空白对照，培养5天。 对照管无菌生长，若加菌的培养基管生长良好，判该培养基的灵敏度检查符合规定。 1101 无菌检查法-方法适用性试验 药典规定 进行产品无菌检查时，应进行方法适用性检验，以确认所采用的方法适合于该产品的无菌检查。 若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时，应重新进行方法适用性试验。 2010年版 2015年版 1、硫乙醇酸盐流体培养基接入小于100cfu的金黄色葡萄糖球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭军(4种） 2、改良马丁培养基接入小于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉（2种） 1、硫乙醇酸盐流体培养基接入小于100cfu的金色葡萄球菌（G+)、大肠埃希菌（G-）、生孢梭菌（厌氧）（3种） 2、胰酪大豆胨肉汤培养基（TSB)接入小于100cfu的枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉（3种） 选用菌株的原则 代表性 普遍性 低或非致病性 标准菌株（或药品中常见的污染菌） 试验方法：薄膜过滤法和直接接种法。可与供试品的无菌检查同时进行。 1101 无菌检查法-供试品无菌检查 无菌检查法包括薄膜过滤法和直接接种法。 只要供试品允许，应采用薄膜过滤法。 供试品检查方法应与方法适用性确认的方法相同。 若是表面活性剂、灭活剂、中和剂等试剂，应证明其有效性，且对微生物无毒性。 检验数量及检验量 2010 2015 表1：批出产品最少检验数量 表2: 液体制剂最少检验量及上市抽检样品的最少检验数量 表3：固体制剂最少检验量及上市抽样的最少检验数量 表1：批出产品及生物制品的原液和半成品最少检验数量 表2: 上市抽检样品的最少检验数量 （液体和固体制剂） 表3：供试品的最少检验量 （液体和固体制剂） 表1、表2中最少检验数量不包括阳性对照试验的供试品用量 1101 无菌检查法-检验量 表1：针对注册性质 表2、针对委托、进口、国评等性质 具体检验量要看检品的装量来综合三个表：如果是注册的则看表1和表3，若果是其他的则看表2和表3 例1：注射用头孢呋辛钠，规格0.25g，注册 查表1得 批产量：﹥500，接种每种培养基所需的最少检验数量：2﹪或20个（取较少者，目前我们都是取20个）查表3得 每支供试品接入每种培养基的最少量：半量（即一瓶样品可以对半接种至每种培养基） 综上述得：取30瓶样品，分三份接种至每种培养基里面。 例2：注射用宫缩素，规格10单位，注册 查表1得 批产量：﹥500，接种每种培养基所需的最少检验数量：2﹪或20个（取较少者，目前我们都是取20个）查表3得 每支供试品接入每种培养基的最少量：全量 综上述得：取60瓶样品，分三份接种至每种培养基里面。 例3： 左卡尼汀注射液，规格5ml：1g左卡尼汀，进口 查表2得