荧光法测定羟基自由基及中草药抗氧化性.pdfVIP

第23卷第4期 德 州 学院 学报 VoI．23，No．4 2007年8月 Journal of Dezhou University Aug．，2007 荧光法测定羟基自由基及中草药抗氧化性 王崔平 (首都师范大学化学系，北京 100037) 摘 要：I 一苯丙氨酸本身具有较弱的荧光，在羟基自由基的作用下能产生较强的荧光，其激发波长和发射波 长分别是277 nlTl和306 nlx1．很多中草药提取物可以清除溶液巾的羟基自由基．从而使溶液的荧光增强程度降低． 据此，建立了一种测定中草药抗氧化性的方法．研究了I 一苯丙氨酸一Fe。 一H () 体系产生羟基自由基的最佳条 件，并测试了赤芍、钩藤、姜黄、炒蒺藜四种中草药水提物的抗氧化活性． 关键词：I 一苯丙氨酸；羟基自由基；荧光法；中草药 中图分类号：0657．3 文献标识码：A 文章编号：l004—9444(2007)04—0040—03 生物体内，氧化代谢过程产生的羟基自由基(· 水为二次蒸馏水． OH)具有强反应活性，它能与蛋白质、糖类等物质 1．2 实验方法 发生链反应，导致细胞损伤甚至疾病．目前，体外检 1)测定原理 测·OH及其清除的方法很多，主要有电子自旋共 Fe抖与H () 发生 Fenton反用产生羟基自由 振 II、荧光l2]及电化学l_3 等方法．笔者以I 一苯丙氨 基：Fe抖+H () 一Fe引+·()H+()H一，I 一苯丙氨 酸(L—Phe)作为探针，荧光法研究了I 一Phe— 酸(I --Phe)与体系中的 ·()H反应生成I 一酪氨酸 Fe 一H () 体系产生 ·()H的最佳条件，并测试 (L—Tyr)的几种异构体：I。一ortho—Tyr、L—meta 了赤芍、钩藤、姜黄、炒蒺藜四种中草药水提物清除 — Tyr、I 一para—Tyr，产物在 306 nm处均能发出 · ()H的能力，建立了一种测定中草药抗氧化活性 较强荧光…，其化学反应可用图1表示．理论上，△F 的方法．该法所用试剂及仪器简单，稳定性好，测定 与反应生成的 I ～Tyr的量成正比，因而与参加反 方便，易于一般实验室采用． 应的 ·OH的产生量成正比，因此测定 I 一Tyr荧 光强度的变化可以间接地测定 ·OH的产生量． 1 实验部分 R R R ． I OH 一 H+ 1．1 仪器与试剂 U l F一4500型荧光分光光度计(日立公司)，pH一 OH 2C型精密酸度计(上海雷磁仪器厂)，KQ一250B型 L-Phe