鼻咽癌形态学发生发展的体视学定量研究.docVIP

　　鼻咽癌形态学发生发展的体视学定量研究 【关键词】 鼻咽肿瘤 　　关键词: 鼻咽肿瘤;形态学;体视学 　　摘 要:目的 探讨鼻咽癌发生发展过程中形态学变化规律. 方法 应用体视学技术测算鼻咽癌发生发展过程中不同时期鼻咽上皮细胞胞质泡状系统（ERGO）和张力原纤维/微丝（TMFTF）的数量，并进行统计学比较. 结果 胞质泡状系统和张力原纤维/微丝的数量在不同鼻咽上皮细胞中数量不同，在统计学有显著性差异. 结论 鼻咽上皮在逐渐癌变过程中，向鳞状上皮分化的趋势加强，而向柱状上皮分化的趋势减弱，这一形态改变具有病理学意义. 　　Keys; morphology;sterololgy 　　Abstract:AIM To study the morphological changing laent of nasopharyngeal carcinoma.METHODS Quantity sterological parameters of ERGo and TMFTF of different periodical nasopharyngeal epithelia cells easured analysed and calculated by sterological and statisti-cal method.RESULTS Parameters ong different periodical nasopharyngeal epithelia cells.CONCLUSION During the canceyation courses of na-sopharyngeal epithelia，epithelia squamous maturial tredency bees strengther and columnar maturial tredency bees i-crofilamenTF:tonofiber;向鳞状上皮分化的标志）;②胞质内质网、高尔基复合体等泡状系统（ER:endoplasmic reticulumGO:golgi plex;向柱状上皮分化的标志）［3，4］ ，思路设计和分析有一定的合理性和科学性.本研究借鉴这一思路，应用体视学技术，按前述的NPC的谱系发生发展的观点，通过对正常鼻咽上皮、NPC癌旁上皮和NPC组织三组NPC形态发生过程中的上皮细胞超微结构分化特征标志（TMFTF，ERG0）的定量测试与比较，从量化角度探讨NPC形态发生的规律. 　　1 材料和方法 　　1.1 病例 　　南方医院就诊病例.所选标本是临床鼻咽癌诊室医师钳取（鼻咽镜下）的新鲜鼻咽癌组织，共取20例鼻咽癌患者的正常鼻咽上皮、鼻咽癌旁上皮、鼻咽癌组织，共计20×3=60个标本.癌组织经病理活检均为低分化鳞癌.要求被取活检的鼻咽癌患者均未经任何抗肿瘤治疗（放、化疗），且为临床首次被确诊的鼻咽癌患者. 　　1.2 标本 　　标本采集后，立即放入25mL#12539;L-1 的戊二醛固定液中固定保存.钳取的标本切取部分（对应剩余部分用戊二醛固定）做石蜡包埋切片，明确病理诊断.光镜下观察为预期标本者（指鼻咽正常柱状上皮、癌旁不典型增生/化生上皮、癌上皮），再将上述对应剩余部分作半薄切片定位.如果光镜观察结果为间质组织或受挤压变形的组织，则放弃处理，重新按要求取材.全部癌组织经病理活检均为低分化鳞癌. 　　1.3 超薄切片 　　拟包埋的电镜标本随机取自固定好的组织标本块.每例的正常组织、癌旁组织和癌组织各取5块.包埋好的标本再作半薄切片和光镜观察，为下一步的超薄切片定位目标组织.需要定位组织包括正常鼻咽上皮组织，癌旁不典型增生/化生组织和标本内的癌组织，半薄切片为2.0μm，在LKB超薄切片机上切制.用LKB型超薄切片机制备超薄切片，200目铜网捞片，醋酸双氧铀-硝酸铅双重染色，干燥后用JEM-1200EX型透射电镜观察. 　　1.4 超微视野的随机确定与体视学测试 　　每个组织块在定位的基础上进行超薄切片并随机选一个含有目标组织的超薄切片进行电镜观察（15000倍）.每个超薄切片随机选5个胞质视野进行观察和拍照，即每个标本共得5×5=25幅照片，以细胞为参照系进行测试，再按体视学原理和测算公式求得每例标本的形态定量体视学参数值 ［5］ ，进行统计比较处理.本实验所用方网测试系统系手法绘制，是规格为90mm×120mm×5mm的方网测试系统（测试点间距d=5mm），测试系统复印在透明胶片上，然后将其直接覆盖在电镜照片上进行测试.用点计数、交点计数和粒子截面计数法进行测试. 　　1.5 体视学参数选择［5］ 　　选用的体视学参数包括:TMFTF的体积密度Vv，长度密度Lv;E