壳寡糖对烟草悬浮细胞茉莉酸合成基因转录的影响.pdfVIP

植物学通报ChineseBulletinofBotany 2008，25(5)：526—532，WWW．chinbullbotany．com - 研究论文- 壳寡糖对烟草悬浮细胞茉莉酸合成基因转录的影响 王文霞 一，李曙光’，赵小明’，林炳承 ’，杜昱光r ’中国科学院大连化学物理研究所，大连 116023； 中国科学院研究生院，北京 100049 摘要 采用RT．PCR方法研究了不同浓度壳寡糖对烟草悬浮细胞茉莉酸合成酶基因的转录调控。结果表明，50 gm·L 壳 寡糖能够明显诱导烟草悬浮细胞茉莉酸合成途径的关键酶——磷脂酶A2、13-脂氧合酶、丙二烯氧化物合成酶、丙二烯氧化 物环化酶和12．氧-植物二烯酸还原酶基因的表达，而且该浓度的壳寡糖对这些基因的诱导作用相同(似)。在实验设定时间内均 诱导表达编码磷脂酶A2的基因，对其它基因的诱导时间均为8小时，表明5O g-mL 壳寡糖在诱抗过程中启动了茉莉酸合成 途径。而200Ilgm·L 壳寡糖的处理对这些基因的表达无显著影响。表明不同浓度的壳寡糖对烟草悬浮细胞的作用模式存在 差异，且高浓度的壳寡糖在烟草悬浮细胞中启动的信号通路可能没有茉莉酸信号的参与。 关键词 诱导抗病性，茉莉酸，壳寡糖，烟草悬浮细胞 王文霞，李曙光，赵小明，林炳承，杜昱光 (2008)．壳寡糖对烟草悬浮细胞茉莉酸合成基因转录的影响．植物学通报 25，526—532． 茉莉酸(jasmonicacid)是一种植物激素，广泛存在 累积密切相关(Dhondteta1．，2000；Halitschkeand 于植物界，具有多种生物学功能(CreeImanandMullet， Baldwin，2003；Stenzeleta1．，2003；Meieta1．，2006； 1997；Halimeta1．，2006)。植物受到昆虫或食草动物 Tanieta1．，2007)。因此对茉莉酸合成相关酶的研究也 攻击、机械伤害、病原菌感染时，体 内的茉莉酸含量 可以反映出逆境对茉莉酸途径的调控。 显著增~jI](Zieglereta1．，2001；Wasternacketa1．，2006)， 寡糖作为植物免疫激活因子的研究始于20世纪60 继而作为信号分子，引发诱导性系统抗病(inducedsys- 年代。1976年Ayers等(1976)发现细胞壁的寡糖碎片 temicresistance，ISR)。茉莉酸是由亚麻酸(1inolenic 能诱导植物植保素(Phytoalexin)的合成。1985年 acid)经十八碳途径(octadecanoidpathway)合成而来。 Darvill及其同事发现霉菌细胞壁片段13．葡聚糖能够激活 亚麻酸在13-脂氧合酶(13一lipoxygenase，13一LOX)的作 植物抗性反应，并且首次提出了寡糖素(oligosaccharins) 用下，在碳链的13位置上加分子氧，生成氢过氧化亚麻 这个新概念，他们认为寡糖素可以激活植物的免疫系统， 酸，再在丙二烯氧化合酶(alleneoxidesynthase，AOS) 诱导植物对逆境产生抗性(Darvilleta1．，1985)。壳寡 的作用下，生成不稳定的环化物，该环化物再由丙二烯氧 糖是氨基葡萄糖以B-1，4-糖苷键连接而成的碱性寡糖， 化环化酶(alleneoxidecyclase，AOC)作用生成12-氧一 由几丁质脱乙酰基后，酸解或酶解得到。壳寡糖在植物 植物二烯酸(12-OXO·phytodienoicacid，12-OPDA)，之 病害防治上具有抑制病原菌侵染、诱导植保素生成及 后12．氧．植物二烯酸还原酶(12-oxop·hytodienoicacid 激发植物 自身抗性等作用(Hadwigereta1．，1994；Khan reductase，OPR)催化12一OPDA)JI]氢生成OPC-8：0(3- eta1．，2003；Cabreraeta1．，2006)，因此也是应用最广 OXO-2．2【一penteny1]-cyclopentane-1。octanoicacid)，冉 泛的寡糖素之一。本实验室应用酶解反应膜分离耦合 经过3次B．氧化代谢为茉莉酸(Weber，2002；吴劲松和 技术制备得到壳寡糖(Zhangeta1．，1999)，聚合度为2— 种康，2002)。许多逆境因子都可以诱导茉莉酸合成过 10，经大 田试验发现对多