饲料分析与检测实验：有机磷农药残留的测定 免费.docVIP

实验十九 有机磷农药残留的测定 【学习目标】 了解饲料原料、配合饲料有机磷农药检测的重要意义，掌握饲料原料、配合饲料有机磷农药含量检测的原理、实验方法，并注意对测定结果的分析和讨论。 一、测定方法 （一）有机磷农药的定性测定 1.刚果红法 （1）原理 样液中的有机磷农药经溴氧化后，与刚果红作用生成深蓝色产物，可鉴别样品中是否存在有机磷农药。 （2）试剂 饱和溴水； 刚果红醇液； （3）操作方法 取粉碎样品用苯浸泡，振摇，用滤纸过滤，取滤液置于蒸发皿中，加入10.0％甘油甲醇溶液1滴，沥干，加水l.0ml，混匀。将样液滴于定性滤纸上，挥发干。将滤纸置于溴蒸气上薰5.0分钟，取出，在通气处将溴挥发尽，滴入0.5％刚果红溶液，置于滤纸的点样处，如果试纸显示出蓝紫色则表示样品中有有机磷存在。呈粉红色者则为溴的色泽。 2.纸上斑点法 （1）原理 样液中的硫代磷酸酯类有机磷与2，6—二溴苯醌氯酰亚胺，在溴蒸气作用下，形成各种有颜色的化合物，用以鉴定是否有有机磷存在以及了解是哪一种有机磷。 （2）试剂 ①饱和溴水 ②2，6— 二 溴苯醌氯酰亚胺试纸 称取0．05g 2，6-二溴苯醌氯酰亚胺，溶于lO.0ml 95.0％乙醇中，将定性滤纸浸湿，晾干备用。 （3）操作方法 吸取按刚果红法制备的样液1滴，置于2，6-二溴苯醌氯酰亚胺试纸上，稍干，置于溴蒸气上蒸薰片刻，呈现出不同颜色的斑点，根据显示出的色泽鉴别属于哪种有机磷农药。试验时防止色素干扰，试纸要临用时制备。有机磷农药呈色反应见下页表3—6。 （二）有机磷药的定量测定 1.原理 用二氯甲烷提取样品中的有机磷农药，样品溶液被气相色谱仪气化成气态组分，由于各种组分在色谱柱中分配系数不同而分离，再用火焰光度检测器(FPD)进行测定。 2.仪器 （1）微量注射器； （2）真空旋转蒸发器； （3）振荡器； （4）具有火焰光度检测器的气相色谱。 表3—6 有机磷农药的呈色反应 农药种类 反应颜色 反应时间 3911 鲜黄，周围较深 5s—3min 1605 淡黄—紫红 30s—3min 1059 鲜黄—暗黄 30s—3min 4049 黄—黄棕 30s—5min 乐果 黄—橙黄 20s—5min M—74 淡土黄—暗紫红 30s—5min 三硫磷 土黄—杏红 15s-5min 1240 鲜黄—暗黄 30s—3min 3.试剂 （1）3.0mol/l盐酸； （2）二氯甲烷； （3）活性炭 lO.0g活性炭用3.0mol/L盐酸浸泡24.0h，抽滤水洗干燥备用。 （4）中性氧化铝 300.0℃活化4.0h后备用。 （5）1.0μg/ml有机磷农药标准储备液 准确称取O.005mg纯品乐果、马拉硫磷、甲拌磷、乙拌磷、倍硫磷、辛硫磷、杀螟硫磷、虫螨磷、稻瘟净、敌敌畏，用苯溶解并稀释至5.0ml混匀，冰箱保存。 （6）0.01μg/ml有机磷农药标准工作液。 4.操作步骤 (1)提取 称准5.0000～10.0000g样品，置于150.0ml三角瓶中，加O.5g中性氧化铝、20.0ml二氯甲烷，在振荡器上振荡40.0min，过滤后分取一定体积进行样品测定。 如农药含量过低，可用蒸空旋转蒸发器浓缩定容至2.0ml，取2.0～5.0μl进行样品测定。 (2)标准曲线绘制 依仪器灵敏度不同配制不同浓度的标准液，用微量注射器分1.0～5.0μl进样，由不同浓度有机磷农药标准溶液的峰高或峰面积绘制标准曲线。 (3)气相色谱仪工作条件 色谱柱：玻璃柱，长2.0m，内径3.0mm； 担体：Chromosorb w AW DMCS，60.0～80.0目； 固定液：2.5％SE—30和3.0％QF—1混合固定液(或1.5％QV—17和2.0％QF—1混合固定液，或2.0％OV—01和2.0％QF—1混合固定液)，甲拌磷、乙拌磷、虫螨磷、倍硫磷、杀螟硫磷和稻瘟净的色谱柱用3.0％PEGA和5.0％QF—1混合固定液； 检测器：火焰光度检测器(FPD)； 气化室温度：250℃； 色谱柱温度：190℃(敌敌畏130℃)； 检测器温度：240℃； 氮气流速：90.0ml/min 空气流速：50.0ml/min 氢气流速：180.0ml/min 5.计算 式中：H1—减去空白值的样品溶液峰高或峰面积； H2—标准溶液峰高或峰面积； C—标准溶液浓度，mg／L；