饲料分析与检测实验：饲料中总磷量的测定 免费.docVIP

实验十、饲料中总磷量的测定 【学习目标】 掌握应用比色测定饲料磷的方法，并测定饲料总磷的含量。 一、原理 将试样中的有机物破坏，使磷元素游离出来，在酸性溶液中，用偏钒钼酸铵处理，生成黄色的(NH4)3PO4?NH4VO3?16MoO3 （磷-钒-钼酸复合体），在420.0nm波长下进行比色测定。其化学反应如下： H3PO4+16(NH4)3M6O4+HNO3+NH3VO3→(NH4)3PO4?NH4VO3?16MoO3+NH4NO3+44NH3↑+16H2O+8H2↑ 二、仪器设备 1.样品粉碎机或研钵。 2.分样筛 孔径0.45mm（40目）。 3.分析天平 感量0.0001g。 4.高温炉 可控制温度在300.0～1300.0℃； 5.坩埚 瓷质，容积50.0ml； 6.容量瓶 50.0ml、100.0ml、200.0ml、1000.0ml； 7.分光光度计 有10.0mm比色杯，可在420.0nm下进行比色测定； 8.刻度移液管 1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml； 9.可调温电炉 1000.0W； 三、化学试剂 1.盐酸溶液 1+1(或1:1)。 2.浓硝酸 3.钒钼酸铵显色剂 称取偏钒酸铵1.25g，加硝酸250.0ml；另取钼酸铵25.0g，加蒸馏水400.0ml溶解，冷却后2种溶液慢慢混合，用蒸馏水稀释至1000.0ml，避光保存。如生成沉淀则不能使用。 4.磷标准溶液 将磷酸二氢钾在105.0℃干燥1h，在干燥器中冷却30.0min，称0.2195g，溶解于蒸馏水中，定量转入1000.0ml容量瓶中，加3.0ml硝酸，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即为50.0ug/ml的磷标准溶液。亦可先配制1.0mg P/ml的浓溶液备用，测定时现稀释为50.0ugP/ml的稀溶液。 四、测定步骤 1.分解液的制备 称取2.0～5.0g试样于坩埚中，准确至0.0002g，在电炉上小火炭化，在炭化过程中，应将试样在低温状态加热灼烧至无烟，再放入高温炉中于650.0℃±20℃下灼烧3h（或测定粗灰分后灰分），在盛灰坩埚中加入盐酸溶液10.0ml和浓硝酸数滴，小心煮沸，将此溶液用定性滤纸过滤转入100.0ml容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，为试样灰化液，亦可用测定粗蛋白质的消化液。 2.标准曲线的绘制 洗净7～9个50.0ml的容量瓶，分别准确移取磷标准溶液0ml、1.0ml、2.0ml、4.0ml、6.0ml、8.0ml、10.0ml、12.0ml、14.0ml于50.0ml容量瓶中，加入10.0ml偏钒钼酸铵显色剂，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置30.0min。以0.0ml溶液为参比，用10.0mm比色池，在420.0nm波长下，用分光光度计测定各溶液的吸光度。以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 3.试样的测定 准确移取1.0～10.0ml试样分解液（含磷量50.0～70.0ug）于50.0ml容量瓶中，加入10.0ml钒钼酸铵显色剂，按步骤2的方法测定，以空白为参比，测得试样溶液的吸光度。用标准曲线查得试样中含磷量。 五、测定结果的计算 1.计算公式 X 样本中总磷（％）＝───── × 100 m×V×100 式中：m—试样质量(g) X—由标准曲线查得试样分解液总磷含量，μg ； V—移取试样分解液体积(ml) 所得到的结果应精确到0.01% 2.重复性 含磷量在 0.5%以上（含0.5%），允许相对偏差3.0%；含磷量在5.0%以下，允许相对偏差10.0% 。 【练习与思考】 1.简述总磷的测定步骤。 2.用干法或湿法制备的试样分解液如果浑浊，是否会影响磷的比色结果？