饲料分析与检测实验：饲料中粗纤维的测定 免费.docVIP

实验五、饲料中粗纤维的测定 【学习目标】 掌握饲料中粗纤维的测定方法，并用于测定各类饲料中粗纤维的含量。 一、原理 粗纤维是指饲料中纤维素、半纤维素及镶嵌物质(主要是木质素)的总称，用一定量和一定浓度的氢氧化钠和硫酸，在特定条件下消煮样品，再用乙醚、乙醇除去可溶物，经高温灼烧扣除矿物质的量，余量称为粗纤维。饲料中粗纤维的测定方法并非一个精确的方法，所得结果只是一个在公认强制条件下测定的概略成分。 二、仪器设备 1.样品粉碎机或研钵。 2.分样筛 孔径0.45mm（40目）。 3.分析天平 感量0.0001g。 4.电热恒温烘箱 可控制温度在130.0℃。 5.高温电炉 有高温计，可控制温度在650.0℃。 6.普通电炉 可调节温度。 7.消煮器 有冷凝球的600.0ml高型烧杯或有冷凝管的锥形瓶。 8.抽滤装置 抽真空装置，吸滤瓶及漏斗。滤器使用200目不锈钢或尼龙滤布。 9.古氏坩埚 30.0ml，预先加入酸洗石棉悬浮液30.0ml（内含酸洗石棉0.2～0.3g），再抽干，以石棉厚度均匀，不透光为宜。上下铺两层玻璃纤维有助于过滤。 10.干燥器 以氯化钙或变色硅胶为干燥剂。 三、试剂 本方法试剂使用分析纯，水为蒸馏水。 1.硫酸溶液 （0.128±0.001）mol/L，每100.0ml含硫酸1.25g，氢氧化钠标准溶液标定。 2.氢氧化钠（0.313±0.001）mol/L，每100.0ml含氢氧化钠1.25g，邻苯二甲酸氢钾法标定。 3.酸洗石棉 市售或自制中等长度酸洗石棉在1:3盐酸中煮沸45.0min，过滤后于650℃灼烧16h，用（0.255±0.005）mol/L硫酸溶液浸泡且煮沸30.0min，过滤，用水洗净酸；同样用（0.313±0.005）mol/L氢氧化钠溶液煮沸30.0min，过滤，用少量硫酸溶液洗一次，再用水洗净，烘干后于650℃灼烧2h，其空白试验结果为每g石棉含粗纤维值小于1.0mg。 4.95.0%乙醇 5.乙醚 6.正辛醇（防泡剂） 四、测定步骤 1.酸处理 精确称样本2.0000g左右(若样本脂肪含量在8.0%以上，须先用乙醚脱脂)小心放入1000.0ml高型无嘴烧杯，用量筒准确加入200.0ml 1.25%H2SO4溶液，并在液面处划一刻度线，立即放于电炉上，装上冷凝球如图3，通入冷水后加热使溶液在1.0min内煮沸，记时，保持微沸状态30.0min加热，要求1.0min煮沸，保持微沸30.0min，30.0min后取下加入蒸馏水200.0ml，静置数min，待样本残渣沉淀后，在抽滤装置上抽去上层清液，再用少量热蒸馏水冲洗布氏漏斗及滤布外附着的样本于无嘴烧杯中，反复冲洗至洗液呈中性(用蓝色石蕊试纸检查不变色)。 2.碱处理 将酸处理过的残渣用牛角勺转入原烧杯，再用少量的（不超过50.0ml） 5%NaOH溶液冲洗滤布于残渣的烧杯中，随即加入煮沸的热蒸馏水至200.0ml刻度处（此时烧杯中NaOH浓度恰为1.25%），将无嘴烧杯在电炉上如酸处理同样微沸处理30.0min，取下加入蒸馏水至200.0ml，静置残渣数min，抽去上清液，用热的蒸馏水冲洗布氏漏斗及滤布后至中性（用红色石蕊试纸检查不变色）。 3.抽滤 将以酸、碱处理后的残渣及溶液移入古氏坩锅中抽滤，然后将烧杯壁残渣完全无损的转入古氏坩锅中，将滤液完全滤干，取下在室温下再用无水乙醇作用残渣10.0min 2次。用乙醚作用古氏坩埚中的残渣2次。无水乙醇和乙醚的用量以浸没残渣为宜。 4.烘干与灰化 将古氏坩锅外壁用水冲洗干净，放入105.0℃±2℃烘箱中烘至恒重，再碳化至无烟，置入650.0℃高温炉中灼烧1～2h，待炉内温度降至200.0℃时，取出并移入干燥器中冷却1h后称至恒重。 五、测定结果的计算 粗纤维重(g) W1－W2 粗纤维％＝ ────── ×100＝ ───── ×100 样本重(g) W 式中： W—样本重(g)； W1—烘干后灰化前坩锅及内容物重(g)； W2—灰化后坩锅及内容物重(g)。 【练习与思考】 1.在粗纤维的测定过程中哪个环节最容易造成实验误差？为什么？ 2.饲料粗纤维的测定结果中，主要物质是 。 3.饲料中粗纤维是在什么公认的条件下进行测定的？谈谈你的认识？