间接免疫荧光方法快速检测番鸭呼肠孤病毒病.pdfVIP

8 JournalofAnimalScienceandVeterinaryMedicine Vo1．31 No ． 4 2012 间接免疫荧光方法快速检测番鸭呼肠孤病毒病 高春亮 ，蔡 羲 ，朱小丽 ，陈少莺 1,2 (1．福建省农业科学院畜牧兽医研究所 ，福州 350013；2．福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心) 摘 要：本研究应用具有免疫荧光特性的抗番鸭呼肠孤病毒病单克隆抗体 (MDRV237一】1)建立 了检测番鸭呼肠孤病毒病抗原 的间接免疫 荧光 (Mab—IFA)方法。结果显示人工感染 MDRV MW9710株病毒后发病和死亡番鸭组织切片均可检 出阳性病灶；且组织匀浆经尿囊腔途径接种 12 日龄番鸭胚 ，取死亡胚心制作冰冻切片进行 IFA鉴定呈阳性结果。表明该方法特异性好、可用于 快速检测番鸭呼肠孤病毒病。 关键词 ：番鸭呼肠孤病毒病；间接免疫荧光试验 ；快速检测 [中图分类号] S858．32 [文献标识码] A [文章编号] 1004—6704(2012)04—0008—02 RapidDetectingMuscovyDuckReovirusbyIndirectFluorescenceAssay GAO Chun—liang ，CAIXi ，ZHU Xiao—li ，CHEN Shao—ying (1．InstituteofAnimalHusbandryandVeterinaryMedicine，F ianAcademyofAgricultureSciences，FuzhouFujiang350013，China 2．FujianAnimalDiseasesControlTechnologyDevelopmentCenter) Abstract：Monoclona[antibody(MDRV 237——ii)againstMuscovyduckreoviruswasusedtobuildupindirectfluorescence assay(IFA)inordertodetectMuscovyduckreovirus(MDRV)．TheresultsshowedthatfrozensectionofMuscovyduckinfec— tedwith MDRV MW 9710strain couldappearspecificbrightgreenfluorescencebyIFA ，moreover。12一 old— dayMuscovy duckembryoinoculatedwithliverandspleenhomogenatewereisolatedthevirus．So，IFA couldreplacevirusisolationtodetect Muscovyduckreovirusrapidly． Keywords：Muscovyduckreovirus；indirectfluorescenceassay；rapiddetecting 番鸭呼肠孤病毒病 (MDRVD)，是 由番鸭呼肠 接免疫荧光试验，为临床番鸭呼肠孤病毒病的快速 孤病毒引起的番鸭 以软脚 、肝脾灰 白色坏死点为特 诊断奠定 了基础。现将结果报道如下： 征的急性传染病。该病 1950年于南非首次报道 ， 1 材料和方法 1972年法 国分离到病毒。1997年 以来在福建、广 东、浙江等地番鸭饲养区出现的一种新的番鸭疫病 ， 1．1 病毒和抗体 其发病率和死亡率均高 ，给番鸭业造成严重经济损 MDRV MW9710CI1细胞 毒 (TCID5010— 失 。而快速诊断是有效预防该病的前提 。目前 国内 5．5／0．1mL)由本室分离保存 、抗 MDRV单克隆抗 番鸭呼肠孤病毒病 的诊断方法主要采用病毒分离 、 体 237—11由本室研制保存 ；FITC一羊抗 鼠Ig购 RT—PCR方法和血清学方法 ，但 由于这些方法繁 自博士德生物有限公司。 琐 、费时