草莓胚状体诱导及形态发生中的生理研究.pdfVIP

摘要 ananassa 本研究以草莓(Fragaria Duch)三个品种和不同器官为材料，对影响 其离体培养中胚状体发生的因素(基因型、外植体种类、外源激素、光照等)、胚状 体形态发生过程、胚状体诱导中内源激素和可溶性蛋白含量等生理变化进行了研究， 旨在为草莓胚状体诱导奠定一定的技术基础和理论基础。主要研究结果如下： l、草莓体细胞胚胎(SE)形态发生经历了与合子胚形态发生相似的阶段，即球 形胚一心形胚—鱼雷形胚一子叶期胚等，最后发育成再生植株。草莓不同器官花药、 花营、叶、叶柄、子叶和下胚轴均能形成体细胞胚，但不同器官外植体的体细胞胚 花药SE诱导率差异显著，丰香、章姬和春旭三个品种中，丰香胚状体诱导率最高。 2、外源激素种类与配比对各器官体细胞胚的发生有明显影响，叶、叶柄、子叶、 下胚轴和花蕾等器官外植体的适宜诱导培养基是MS+BA2．00 nag·L。 rag·L“+IAAl．00 诱导并非在任何情况下都是必需的，在有适宜浓度BA存在的条件下，不加任何生长素 于BA与其他种类生长素(NAA、IBA和2^D)的配合。 伤组织发生始期一高峰期一衰老期，IAA、ZR、GA3的含量呈现下降一上升一再下 降的相应变化，而ABA含量则持续下降。胚性愈伤组织(EC)较非胚性愈伤组织 (NEC)中IAA、OA3含量高。愈伤组织转入分化培养初期，四种激素含量均下降， 峰，整个分化培养阶段IAA含量持续下降。 研究结果表明：高水平的ZR和ZR／IAA比值促进愈伤组织发生；EC的分化与 4、草莓花药采用常规光照培养(每天llh光照，13h黑暗)为宜。短时期的黑 暗培养可以提高出愈率；长期暗培养不利于愈伤组织诱导。 关键词革莓：胚状体：诱导：形态发生：生理变化：内源激素 1前言 artagla$$d 是风梨草莓(FragariaDuch)。草莓果实色泽鲜艳，香气浓郁，柔嫩多汁， 酸甜爽口，营养丰富，素有“小浆果之王”的美誉【IJ。草莓既可鲜食也适于加工成多种 产品，是当今七大水果之一。 我国于1915年开始从俄国引种草莓。20世纪80年代后我国草莓生产得到迅速 我国革莓栽培面积达6万多公顷，超过美国，跃居世界第一位14】。近年来四川省草莓 栽植面积和产量增长很快，并在双流县建成了我国冬草莓生产基地。冬天正值鲜果 市场淡季。冬草莓上市独树一帜，深受消费者喜爱。目前四川冬草莓已畅销省内外， 并开始进入东南亚国际市场。草莓生产已成为一些地区农村经济发展的重要支柱之 一。 但是，我国革莓生产与草莓生产发达国家相比，存在诸多问题。我国草莓单位 面积产量较低而且不平衡，平均每公顷产量约7500kg，而美国、日本等发达国家为 000 30000--75 kg[3I。草莓易感病染真菌病害(如白粉病、灰霉病、黄萎病、炭疽病 等)和病毒病，(草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓镶脉病毒和草莓皱缩病毒 等)，造成品种退化，果实产量和品质下降0-51，农药残留超标。此外，草莓种苗生 000株)f3l，因而种苗 产多采用匍匐茎繁殖，种苗用量大(666．7m2需种茁8000—10 繁殖占用土地面积大，种菌调运亦不方便。充分利用草莓种质资源，培育适宜我国 生态条件和设施栽培的、抗病(虫)性强的、优质高产草莓新品种，是我国草莓生 产中亟待解决的问题。转基因技术、体细胞融合技术等被广泛应用于作物抗性育种 和商品质育种，也将是草莓品种改良的新的熏要手段。各种植物人工种子的研制， 为草莓种苗集约化生产展示了新路子。已通过农杆菌介导的叶盘转化法，成功地获 得了草莓转基因植株【6】．体细胞胚胎(SE)是理想的外源基因受体和生产人工种子 的基础川。SE诱导及其发生机制的研究不仅有重要的理论意义，而且在基因工程、 人工种子培育、体细胞融合、细胞突变体诱导、种质保存、苗木快速繁殖等诸多方 面，有着广阔的应用前景。但是，迄今对草莓胚状体的研究报道不多。本研究以我 国草莓主栽品种丰香、章姬和春旭为材料，通过花药为主的器官离体培养，对胚状 体诱导技术、影响胚状体发生的因素