中药复方水提液对人牙周膜成纤维细胞增殖和总蛋白含量影响的实验研究.pdfVIP

j 验研j 梭形 。胞体丰满 ．胞质均匀，细胞核椭 圆，核仁清晰，位于中央。 以反映细胞功能旺盛与否 。采用 MTY法测定中药复方水提液 细胞两极有多个细长突起 ．与邻近细胞的突起互相连接成立 对牙周膜细胞增殖的影响 ．结果显示中药复方水提液在浓度 体 网(图 2)所培养 的HPLF为抗波形丝蛋 白阳性 细胞胞浆 1x10-3~mL时最有利于细胞增殖 ．明显促进 HPLF增殖 ．与对 棕黄色着色．角蛋 白染色阴性 证 明所培养的细胞为来 自中胚 照组 比较有显著性差异 牙周膜细胞 的蛋 白成分除了组成本 层的成纤维细胞 身结构和维持生存 、增殖必需的蛋 白外 ．主要是与细胞功能密 3．2 Mrrr法测定细胞增殖 从表 1可见 ．中药复方水提液浓 切相关的蛋 白成分[sl采用考马斯亮蓝法测定不同浓度 中药复 度在 1xl0-7～1xl0一g／mL时 ．均 能明显促进 HPI 增殖 ．与对 方水提液对 HPLF总蛋白含量 的影响．结果表 明中药复方水 照组 比较 ．有显著性差异 ．且浓度在 1xl0-3g]mL时作用效应 提液浓度在 1xl0~mL时能增加HPLF总蛋 白的合成．与对 最大 。在低浓度范围内．随着 中药复方水提液浓度 的增大，细 照组 比较有显著性差异 说明中药复方水提液对 HPLF有促 胞 的OD值逐渐增大，在第 5d达到最大 对各组在 D1、D3、 进蛋 白质合成的作用．可以使HPLF功能更加旺盛 D5三个时间点的增殖作用 比较 ．对 照组 、lxl0~ 1xl0~g／mL 中药复方水提液以清热解毒药物为主 ．我们在另外的研 组及 lxlO一2gm／L组三个时间点之间细胞的增殖作用均有差异 究中发现其有较广泛的抗菌谱 ．可明显抑制细菌的生长 ．制成 (P0．05)，而 lxl0-3~mL组i个时间点之间细胞的增殖作用差 漱 口液漱 口能使菌斑指数 、牙龈指数显著下降 q本研究从 异无显著性 (尸O．05)。可见在 lxl0~～1x10-3gm／L范围内．中药 另一个侧面观察到中药复方水提液能促进HPLF增殖及蛋 白 复方水提液促进细胞增殖作用显示 出明显的浓度依赖效应和 质合成 传统牙周手术治疗及引导性组织再生术 (guided 时间依赖效应 从表 1还可见 ．药物浓度达到 1x10-2g／mL时增 tissueregenerati0n．GTR)并不能使牙周膜细胞数量明显增加． 殖作用下降．显示 l~10-3~mL的药物浓度最有利于细胞增殖 难 以达到完全生物学意义上 的再生。转化生长因子 B、骨形成 3．3 考马斯亮蓝法测定细胞总蛋 白 从表2可见 ．中药复方 蛋白和碱性成纤维细胞生长因子等都可 以提高牙周膜细胞的 水提液浓度在 1×10 1xl0-3g／mL时．能够明显增加 HPLF总 增殖活性8[,11-1．而 中药复方水提液在 中药方面为今后在牙周 蛋白的合成 ．与对照组 比较 ．差异有极 组织修复再生中的临床应用提供了客观依据 但牙周膜细胞 显著性 (P0．01)：浓度为 1xl0-s时在 D1时与对照组 比较 ．差异有显著性 (P0．05)；当中药复方水提液浓度低 于 1×10~g／mL时 ．作用效应差异无显 著性 随着 中药复方水提液作用时间 的延长．细胞的OD值逐渐增大．各组 在D1、D3、D5三个时间点之 间差异有 极显著性 (P0．O1)。lxl0g／mL时 ，D3、 D5之 间P0．05在 1xl0～1×10。gm／L 范围内．中药复方水提液促进 HPLF 图1人牙周膜细胞原代培养第10d(10xl0) 图2人牙周膜细胞原代培养第20d(10xl0) 总蛋 白的合成显示 出浓度依赖效应和 时间依赖效应 表 1 不同浓度的中药提取液不同作用时间对细胞增殖的影响 4 讨论 牙周治疗 的最终 目标是创造一个 在健康牙周组织的条件下能行使 良好 功能的牙列 ．其中促进牙周组织的再生 和形成新附着是关键 ．其基础是病变部 位有足够数量 的健康牙周膜成纤维细 胞 成纤维细