超高效液相色谱法测定饲料中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的含量.pdfVIP

摘 要 采用超高效液相色谱仪(UPLC)测定饲料中苏丹红I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的含量。用乙腈提取饲 料中的苏丹红染料，取部分提取液浓缩后直接用 raters超高效液相色谱仪进行检测。测定参数：AC— QUITY UPLCTM BEH C18柱(2．1 mmxl00 mm i．d．，1．7 m)；流动相：乙腈 ：水=90：l0；流速0．25 ml／min； 苏丹红I检测波长为478 nm。苏丹红Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ检测波长为520 nm。苏丹红I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ浓度在0．01- 10 Ixg／ml范围内与峰面积呈线性相关，r=-O．999 9；平均回收率85．7％-94．4％；定量M-(S／N=10)0．0l mg／kg； 在本试验条件下苏丹红染料4种成分均无基质干扰。 关键词 苏丹红；超高效液相色谱仪；饲料 中图分类号 S8l6．17 苏丹红染料是一组人工合成的以苯基偶氮萘酚 0～2．5 min时波长为478 nm，2．5 min时波长切换成 为主要基团的亲脂性偶氮化合物，在欧洲委员会公布 520 nm。 的名单上有6个品种，其商品名分别为苏丹红I、苏 1．3 标准溶液的配制 丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ、苏丹橙 B和苏丹红7B。 分别准确称取苏丹红I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ标准品50 mg 其中苏丹红 I～Ⅳ，尤其是苏丹红 I常被用于食品着 于50 ml容量瓶中．加乙腈超声溶解。放冷至室温后 色剂。由于苏丹红能引起试验动物肝脏、膀胱细胞癌 用乙腈定容，配制成 l mg／ml苏丹红 I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ标准 变．对人体健康有害并可能致癌．1995年欧盟国家已 贮备液。分别量取上述标准储备液5．0 ml于50 ml容 禁止其作为食用色素，我国在《食品添加剂使用卫生 量瓶中，用乙腈定容，配制成100 Ixg／ml苏丹红I、Ⅱ、 标准》中也禁止将苏丹红作为食品添加剂使用。 Ⅲ、Ⅳ混合贮备标准液。取混合贮备标准液用90％乙 1 材料与方法 腈溶液(V／V)逐级稀释成 l0、2．0、1．0、0．5、0．2、0．1、0．05、 1．1 仪器与试剂 0．0l g／ml的混合标准工作液。 Waters超高效液相色谱仪(带紫外检测器)；AC— 1．4 样品的提取 QUITY UPLCTM BEH Cl8柱f2．1 mmxlO0 mm i_d|。1．7 m1； 称取粉碎后的饲料 10 g放 100 ml带塞锥形瓶 苏丹红I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ对照品f购自Dr．EhrenstorferGmb}{)。 中，加入乙睛50 ml，与涡旋振荡器上振荡30 min后 乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。实验室用一级 静置，待提取液澄清后准确量取上清液l0 ml于玻璃 水，由Millipore milli—Q超纯水系统制备。 管中，氮气吹干，加入 1．0 ml 90％乙腈溶液涡旋混合 1．2 色谱条件 l min充分溶解残留物，用孔径为0．22 m的有机滤 流动相：乙腈 ：水=90：10，等度洗脱．流速0．25 膜过滤，滤液上机测试 ml／min、柱温30 c【=、进样量2 l、苏丹红I检测波长为 1．5 空白对照的制备 478 nm，苏丹红Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ检测波长为520 nm．检测时 称取空白饲料 10 g，同1．4节中样品的提取方法 进行处理后上机 2 试验结果 曹起灵，河南永城成人中等专业学校，476600，河南永城。 2．1 方法的专属性 李锐，永城市畜牧局。 分别取 1．0 Ixg／ml的苏丹红 I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ对照溶 方忠意、刘素梅(通讯作者)，河南省畜产品质量监测检验 液，按照 1．2节液相色谱条件下，用UPLC单针进样测 中心。