应激对肉鸡盲肠菌群的影响及维生素C的缓解作用.docVIP

　　应激对肉鸡盲肠菌群的影响及维生素C的缓解作用 刁海涛，郑秀娟，周 飞，姚维剑，韩 雨，贺绍君 （安徽科技学院，安徽 凤阳 233100） 基金项目：安徽省科技厅自然科学基金项目（1508085QC61）；安徽省大学生创新创业训练项目（AH201310879071；AH201410879033） 摘 要：目的：研究肉鸡由于多种原因发生应激对其盲肠微生物菌群的影响及饮水中添加维生素C的缓解作用.方法：试验选用AA肉鸡60只，随机均分为三个组即对照组、应激组、VC+应激组.试验从肉鸡21日龄开始，持续3g/kg体重）7d，VC+应激组注射地塞米松（2mg/kg体重）的同时，饮水按0.2%浓度剂量添加VC至42d，正式试验3l甲醛15g高锰酸钾对鸡舍进行熏蒸.试验鸡采用笼养方式按7d接种新城疫，滴鼻或点眼，14d饮水接种法氏囊疫苗进行免疫.自由采食和饮水定期清理粪便预试2L，振荡，制成10-1稀释液，用移液枪准确吸取该稀释液0.5mL到盛有4.5mL事先灭菌的试管中，振荡，制成10-2稀释液，依次进行稀释到10-7. （3）接种和培养.大肠杆菌利用麦康凯培养基计数，乳酸杆菌利用MRS培养基计数，双歧杆菌利用TPY培养基计数，分别吸取10-5和10-6稀释液于无菌培养皿中，每个稀释度2个重复. （4）计数.细菌进行培养后按可数性原则计数.大肠杆菌选取粉红色或红色表面光滑、凸起、边缘整齐不透明、直径2～2.5mm的圆形菌落进行计数.乳酸杆菌选取乳白色表面光滑、凸起、边缘整齐不透明、直径1～2mm的菌落进行计数.双歧杆菌选取菌落光滑、凸圆、边缘完整、乳脂至白色的双歧杆菌进行计数. 1.5 数据处理 数据统计利用SPSS18.0软件的ANOVA进行数据分析，用LSD法进行各组间多重比较.Plt;0.05和Plt;0.01分别为差异显著和极显著水平. 2 结果 2.1 应激对肉鸡盲肠内乳酸杆菌的影响 由表1可知，试验开始时21d肉鸡盲肠内乳酸杆菌数量没有明显变化，差异不显著（Pgt;0.05）.在28d、35d、42d时，与对照组相比，应激组和VC+应激组肉鸡盲肠内乳酸杆菌数量明显降低，且差异极显著（Plt;0.01）.VC+应激组与应激组相比，肉鸡盲肠内乳酸杆菌数量均升高，且差异极显著（Plt;0.01）. 2.2 应激对肉鸡盲肠内双歧杆菌的影响 由表2可知，试验开始时21d肉鸡盲肠内双歧杆菌数量差异不显著（Pgt;0.05）.在28d时，各实验组肉鸡盲肠内双歧杆菌数量差异不显著（Pgt;0.05）.在35d和42d时，与对照组相比，应激组和VC+应激组肉鸡盲肠内双歧杆菌数量均明显下降，差异显著或极显著（Plt;0.05或Plt;0.01）；VC+应激组与应激组相比，肉鸡盲肠内双歧杆菌数量有明显升高，差异极显著（Plt;0.01）. 2.3 应激对肉鸡盲肠内大肠杆菌的影响 由表3可知，试验开始时21d肉鸡盲肠内大肠杆菌数量无明显差异（Pgt;0.05）.在28d时，与对照组相比，应激组和VC+应激组肉鸡盲肠内大肠杆菌数量均明显升高，且差异极显著（Plt;0.01）；VC添加组与应激组相比，（Pgt;0.05）.在35d时，与对照组相比，应激组和VC+应激组肉鸡盲肠内大肠杆菌数量均升高极显著（Plt;0.01）；VC+应激组与应激组相比，肉鸡盲肠内大肠杆菌数量有明显下降（Plt;0.01）.在42d与对照组相比，应激组肉鸡盲肠内大肠杆菌数量增高了9.03%，差异极显著（Plt;0.01）；VC+应激组与应激组相比，肉鸡盲肠内大肠杆菌数量明显降低，且差异极显著（Plt;0.01）. 3 讨论 3.1 应激与乳酸杆菌的关系 乳酸杆菌目前是广泛应用的一种肠道益生菌，它是温血动物肠道中的优势菌群[6].虽然乳酸杆菌不是鸡肠道内的优势菌群，但普遍认为乳酸杆菌是鸡肠道的正常菌群成员[7，8].应激时会对肉鸡肠道内的微生物菌群产生一定影响，研究报道，受到热应激时鸡空肠和盲肠中的乳酸杆菌群数量减少，微生态平衡被破坏[9].本实验结果显示，应激时，28d、35d、42d肉鸡盲肠内的乳酸杆菌的数量降显著（Plt;0.01），与上述结果是一致的.同时在饮水中添加VC可以缓解应激对肉鸡肠道的损伤作用，有助于恢复肠道内乳酸杆菌的数量.由上述可知，肠道是应激损伤的主要靶器官，盲肠内的乳酸杆菌的稳定对肠道健康的维护有重要的作用，应激时乳酸杆菌的平衡被打破，就会引起乳酸杆菌的数量发生变化，造成对机体的影响. 3.2 应激与双歧杆菌的关系 双歧杆菌和乳酸杆菌一样都是肠道内正常的菌群，在维护肠道健康和微生物平衡上具有重要作用.双歧杆菌作为机体肠道内的优势菌、指示菌之一，对人体有着重要的保健功能[10，11].研究报道，应激时会使肉鸡空肠和盲肠内的双歧杆菌的数量减少，微生态平衡