青蒿素合成生物学及代谢工程研究进展 - 文献.pdf

2011 年 第 56 卷 第 27 期：2289 ~ 2297 《中国科学》杂志社 评 述 SCIENCE CHINA PRESS 青蒿素合成生物学及代谢工程研究进展 ①② ①② 曾庆平 , 鲍飞 ① 国家中医药管理局原虫与病毒重点实验室, 广州 510405; ② 广州中医药大学热带医学研究所, 广州 510405 E-mail: qpzeng@ 2011-06-03 收稿, 2011-08-08 接受 国家自然科学基金和国家留学回国人员科技活动择优项目(2009 年度)资助 摘要 青蒿素生物合成途径仅见于青蒿, 但其“上游”途径为真核生物所共有, 可望通过“下游” 关键词 途径重建, 在真核微生物(如酵母) 中全合成青蒿素. 过去 10 年来, 青蒿素合成基因被国内外研 青蒿素 究团队陆续克隆并导入酿酒酵母细胞, 已成功合成青蒿酸及双氢青蒿酸等青蒿素前体. 由于酵 酵母工程菌 母缺乏适宜的细胞环境, 尚不能将青蒿素前体转变成青蒿素. 因此, 青蒿依然是青蒿素的唯一 转基因青蒿 合成生物学 来源, 凸显出继续开展青蒿种质遗传改良的必要性. 我国科学家采用“开源”或“节流”等策略, 代谢工程 已相继培育出多种转基因青蒿植株或品系, 为实现青蒿素的高产、稳产奠定了坚实的基础. 同 时, 青蒿素生物合成的限速步骤尤其是终端反应机制已基本得到阐明, 有助于开展青蒿素形成 与积累的环境模拟及仿生, 从而为彻底缓解青蒿素的供求矛盾创造先机. 本文最后讨论了产青 蒿素前体微生物专利的作用及中国避免这些专利壁垒的方法. 青蒿素(artemisinin)是中国科学家于 20 世纪 70 开展了青蒿素合成生物学及代谢工程研究, 一方面 年代从传统中草药青蒿或称黄花蒿(Artemisia annua 尝试在微生物体内重建青蒿素生物合成途径[5], 另一 L.) 中分离提纯的抗疟有效单体, 其化学本质是含有 方面对青蒿中原有的青蒿素生物合成途径进行遗传 “过氧桥”结构(1,2,4-三噁烷环) 的倍半萜内酯[1]. 以青 改良[6]. 蒿素为母核经人工半合成获得的青蒿素琥珀酸酯(青 在 Bill Melinda Gates 基金赞助下, 由 One 蒿琥酯) 、青蒿素甲醚(蒿甲醚) 、青蒿素乙醚(蒿乙醚) World Health 非赢利组织主导, 在 Amyris Biotechno- 和双氢青蒿素等青蒿素类药物, 血中溶解性好, 生物 logies 公司和 Sanofi-Aventis 公司参与下, 美国加州大 利用度高, 对氯喹抗性疟疾及致命性脑型疟有特效, 学伯克利分校 Keasling 研究小组会同加拿大植物生物 已成为世界卫生组织(WHO)倡导的“基于青蒿素的联 技术研究所 Covello 研究小组, 于2004 年启动了以高 合疗法”(artemisinin-based combination therapies, ACTs) 产青蒿素酵母工程菌构建为目标的“青蒿素项目” (The 首选的抗疟新药, 其中青蒿琥酯、蒿甲醚及蒿甲醚复 Artemisinin Project). 该项目实施至今已获得产青蒿酸