LC-MS在现代药物分析中的应用.doc

LC-MS在现代药物分析中的应用 S0950751 江丽 摘要：随着现代色谱技术的应用发展，色谱联用技术应运而生。LC-MS技术将LC的高分离效能和MS的高灵敏度、高选择性结合起来，成为药物研究的有力工具。本文主要从LC-MS技术的优势、特点、发展以及应用等方面对该技术作详细介绍。 关键词：液相-质谱联用；药物分析；应用；分离 现代色谱技术是药物分析领域重要的分离分析手段，随着其研究工作的迅速发展，各种新的色谱方法和检测技术也日趋成熟，色谱联用技术随之应运而生，因其具有高速、高效、高分辨、微量检测及分析自动化的性能和技术趋势，而显示出广阔的应用前景。LC-MS技术将LC的高分离效能和MS的高灵敏度、高选择性结合起来，成为了药物研究中强有力的工具，得到了普遍应用。本文主要从液质联用的优势、发展、特点以及各方面的应用进行综述。 LC-MS的优势 LC-MS技术是以HPLC为分离手段，MS 为检测器的一门综合性分析技术,它集LC 的高分离能力与MS 的高灵敏度、极强的定性专属特异性于一体,成为体内药物分析研究中不可或缺的有效工具，弥补了传统LC检测器的不足[1]。 与气相色谱-质谱联用技术相比，GC样品要求有一定的蒸汽压，导致在实际应用中，只有少部分样品可以不经处理达到GC的要求，大多数情况下都需要做预处理或衍生化使之易气化才能进行GC-MS分析；而液相色谱不受上述限制,可分离高极性的和热不稳定的化合物，从而能得到更广泛的应用。 LC-MS的发展 1977年,LCMS开始投放市场;1978年,LCMS首次用于生物样品的药物分析;1989 年,LCMS-MS取得成功;1991年,API LCMS用于药物开发;1997年,LC MS用于药物动力学筛选;1999年,API QTOF LC-MS-MS投放市场[];到2000年时,LCMS在药物色谱分析中的应用比例就已经占到了80%左右。大气压离子化(API) 接口的应用,彻底改变了LCMS的面貌[3]。 LC-MS联用仪主要由液相色谱系统、质谱仪、连接接口和数据处理系统四部分组成,从质谱的离子源角度来划分,包括电喷雾离子源(ESI) 、大气压化学电离源(APCI) 、大气压光电离源(APPI)和基质辅助激光解吸电离源(MALDI)等操作模式。ESI、APCI和APP I三种离子源大多与四极杆和离子阱质谱联用,是目前应用最广泛的几种液质联用仪[4]。 从离子源角度来看, ESI适合分析中高极性的化合物,特别适合于反相液相色谱与质谱联用,是目前液质联用中应用最广泛的一种离子化方式; APCI采用电 晕放电来电离气相的分析物,因此要求被分析物具有一定的挥发性,最适合分析中、低极性的中等分子量化合物,不易形成多电荷,谱图解析相对简单; APPI是在 大气压下利用光化作用将气相的被分析物离子化的技术,其适应范围与APCI相似, 是对APCI的补充;MALDI则是将样品加入到一种能够强烈吸收入射激光的基质中,通过能量转移产生样品的分子离子或准分子离子,现已被广泛应用于分析蛋白质、肽类、苷酸、多糖以及合成聚合物等。但由于MALDI自身的特点,目前直接在线与LC联用的应用研究还相对较少[5]。 LC-MS的应用 中药指纹图谱研究 中药指纹图谱是指中药材样品经适当处理后，经光谱或色谱测定得到的组分群的特征图谱或图像（能够标示该中药材特性的共有峰），可以用来确保药品的质量及疗效的安全性和可靠性。中药的成分复杂多样，分离提纯的难度大，LC-MS技术不需要进行繁琐的前处理，因此在中药的分析定性研究中得到广泛的使用。 张尊建等[6]采用HPLC-UV-MS法,在C18柱上用甲醇和甲酸为流动相进行梯度洗脱，分别对忍冬指纹图谱中8个色谱峰和山银花图谱中5个色谱峰进行了初步定性，并比较了2种药材指纹图谱的差异。Kite GC[7]等采用LC（-）ESI-MS分析了了皂树(Quilla ja sapona ria)中100多种皂苷类成分的结构。另外，采用LC-MS联用的方法分析的中药成分的研究还有杨桃[8]、黄芩[9]、冬虫夏草[10]、枳壳和枳实[11]、甘草[12]、人参[13]、三七[14]等。 4.2 未知成分定性分析 有些结构相似的多组分复合物，用常规分析方法对其进行快速鉴别和相关物质分析比较困难，药品质量难于控制，而LC-MS技术以其强有力的分离和分析能力，在这类未知成分的定性鉴别方面显示了巨大的优势。 现代药理学研究表明，柴胡中柴胡皂苷类成分含量最高，具有解热、镇静、镇咳等作用，其中，柴胡皂苷A和D药理活性最强。刘密新等[15]在Kromasil C18柱上用乙腈和水梯度洗脱，采用正离子扫描方式、电喷雾法等质