正交法优化植物生长调节剂在黄芪愈伤组织生长中的应用.doc

　　正交法优化植物生长调节剂在黄芪愈伤组织生长中的应用 ：步营，陈显化，王子茜，张宗申 【摘要】 　　目的研究膜荚黄芪叶愈伤组织诱导、生长及黄芪多糖合成的最佳生长调节剂组合。方法以膜荚黄芪叶为外植体，运用正交设计研究 6-BA、2,4-D 和 NAA 等3种植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导、培养及黄芪多糖合成的影响。结果分别以诱导率、相对生长速率和黄芪多糖含量为指标，结果表明 NAA 和 6-BA 对愈伤组织诱导率影响显著，6-BA、2,4-D 和 NAA 都对愈伤组织的生长影响显著，2,4-D 和 NAA 对黄芪多糖合成影响显著。结论诱导愈伤组织的最佳培养基为：MS+2,4-D（0.5 mg·L-1）+6-BA（1.0 mg·L-1）+NAA（2.0 mg·L-1）；愈伤组织生长的最佳培养基为：MS+2,4-D（0.5 mg·L-1）+6-BA（2.0 mg·L-1）+NAA（2.0 mg·L-1）；促进黄芪多糖合成的最佳培养基为：MS+2,4-D（1.0 mg·L-1）+6-BA（1.0 mg·L-1）+NAA（1.0 mg·L-1）。 【关键词】 膜荚黄芪 植物生长调节剂 愈伤组织 正交设计 黄芪多糖 　　Abstract：ObjectiveTo study the optimum binations of plant gro the leaves of Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.MethodsTaking the leaves of Astragalus Membranaceus (Fisch.) Bge as explants, three kinds of plant groeters, including induction rate，relative groating the efficiency of three regulators, both NAA and 6-BA could induce callus most effectively, three of 6-BA, 2,4-D and NAA all could affect the groarkably, and both 2,4-D and NAA could promote the synthesis of polysaccharides effectivelyas pared al culture medium for callus induction is:MS+2,4-D（0.5mg·L-1）+6-BA（1.0 mg·L-1）+NAA（2.0 mg·L-1）；The optimal culture medium for callus grog·L-1）+6-BA（2.0 mg·L-1）+NAA（2.0 mg·L-1）; and the optimal culture medium for the synthesis of Astragalus polysaccharides is: MS+2,4-D（1.0mg·L-1）+6-BA（1.0 mg·L-1）+NAA（1.0 mg·L-1）. 　　Key embranaceus (Fisch.) Bge.； Plant groembranaceus (Fisch.) Bge.和蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongho licus (Bge.) Hsiao是它的法定基原，为正品。黄芪的药用成分主要是皂苷类、黄酮类和多糖等，在抗衰老、增强免疫力、强心降压等方面有重要的作用［2，3］。由于长期大量、无节制采挖和环境的污染，造成野生黄芪资源几近枯竭［4］；而人工栽培的药用黄芪，存在着劳动强度大、品质控制困难以及可耕地减少等限制因素。所以，利用生物技术大规模生产黄芪原材料，满足日益增长的医药市场需要，成为解决黄芪资源不足的重要途径之一。 　　本文以膜荚黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.)Bge.叶片为外植体，应用正交设计实验，研究 6-BA，NAA 和 2,4-D对愈伤组织的诱导、生长和黄芪多糖合成的影响，以期筛选适宜的生长调节剂组合。 　　 1 材料与方法 　　1.1 材料供试为盆栽膜荚黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.的幼嫩叶片。 　　1.2 正交实验设计采用L9(34)正交设计，研究 6-BA，NAA和2,4-D等 3 种植物生长调节剂对愈伤组织诱导和生长以及黄芪多糖合成的影响，因素水平见表1。采用 MS 基本培养基，其中含 30 g·L-1的蔗糖和 8 g·L-1的琼脂，pH 5.8。本文所有