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专题3 课题1 菊花的组织培养 【自主学习】 1. 2.细胞分化指在个体发育过程中，相同细胞的后代在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。 3.愈伤组织是离体的植物组织通过细胞分裂形成的排列疏松而无规则、高度液泡化的、呈无定形状态的薄壁细胞。 4.在植物组织培养过程中，往往需要使用生长素和细胞分裂素，人为的控制细胞的脱分化和再分化过程。 5.在诱导细胞分裂分化过程中，先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂，但细胞不分化；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化；同时使用生长素和细胞分裂素，分化频率提高。 【互动课堂】 知识点一 1.植物组织培养的基本过程 ⑴阅读资料，右侧知识填空 资料分析一 小块组织 思考：在组织培养过程中，植物细胞的全能性之所以能够成功的表达，是因为植物细胞处于离体状态，操作均在无菌环境中进行，培养基包含种类齐全、比例适宜的营养物质和适宜的植物激素（如生长素和细胞分裂素），在适宜的温度、pH、光照等环境条件下培养。 ⑵阅读，右侧知识填空 离体的植物器官、组织或细胞（外植体） 脱分化（去分化） 愈伤组织 再分化 试管苗 完整的植物体 思考：⑴以上过程得以实现所依据的原理是植物细胞的全能性；在上述过程中，细胞增殖的方式是有丝分裂；经过脱分化所形成的愈伤组织属于薄壁细胞，具有排列疏松而无规则、高度液泡化、呈无定形状态的特点。 ⑵同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因不同（相同/不同）。 2.影响植物组织培养的因素 阅读资料，右侧知识填空 资料分析 Ⅰ.不同植物各种组织和器官分裂能力不同，选择恰当外植体既有利于在较短时间内形成组培苗，又有利于消毒，避免污染，提高成功率。 知识点一 1.植物组织培养的基本过程 ⑴植物组织培养的概念：在无菌和人工控制的营养及环境条件下，将外植体（离体的植物器官、组织片段或细胞）培育成完整植物的技术。 ⑵植物组织培养的理论基础：全能性 ①全能的概念： ②植物细胞全能性表达的条件： b.无菌环境； c.种类齐全、比例适宜的营养物质； d.适宜的温度、pH、光照等环境条件； e.适宜的植物激素（如生长素和细胞分裂素）。 ⑶植物组织培养的基本过程 ①细胞分化：在个体发育过程中，相同细胞的后代在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。 ②脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，也叫去分化。③愈伤组织：离体的植物组织通过细胞分裂形成的排列疏松而无规则、高度液泡化的、呈无定形状态的薄壁细胞。 ④再分化：愈伤组织经培养，重新分化成根或芽等器官的过程。 2.影响植物组织培养的因素 ⑴外植体的选取 ①不同植物的组织培养难度不同； 影响因素 原 因 外植体年龄 通常外植体年龄越小，分化程度越小，组培成功率越高 外植体大小 外植体过小极易死亡，过大不易消毒 外植体部位 芽尖、根尖或幼嫩茎的组织细胞分裂能力强，含病毒少 外植体形态 表面相对光滑的外植体容易消毒彻底 思考：菊花组织培养，通常选未开花植株的茎上部新萌生的侧枝，其原因是该处组织生长旺盛，生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。 Ⅱ. MS培养基中包含有大量元素N、P、K、Ca、Mg、S和微量元素B、Cu、Zn、Mn、Mo、Fe等，N一般用氨态氮和硝态氮，P多用磷酸盐，S用硫酸盐，以上元素提供细胞生活所必需的无机盐；碳源，维持细胞渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。⑴与微生物培养基以有机营养为主不同， MS培养基需提供大量无机营养。⑵培养基用蔗糖而非葡萄糖的原因，是在为植物细胞提供碳源的同时，也起到维持植物细胞渗透压的作用。 Ⅲ.培养基中要根据具体要求适当添加植物生长调节剂，常用的有生长素类和细胞分裂素类物质。按照不同的顺序使用两种激素，会得到不同的实验结果，同时使用两种激素时，也会因比例的不同而使实验结果不同。 Ⅳ.外植体接种后，置于以灭菌且可人工控制光照和温度等条件的培养室中培养。一般将温度控制在18～22℃，有的需要昼夜温差。对光照的要求，因组织的不同而异，茎尖和叶片培养需要光照，根组织培养常在暗中进行。 ◆随讲随练1◆ 某班级四个实验小组根据本科所学内容进行菊花组织培养实验，具体实验操作如下，请将操作过程中的不合理之处找出，并加以改正 第1小组选取刚刚开过花的菊花植株的 未开花的 茎的中部作为实验材料。第2 的主要成分及配方为：碳源——牛肉膏；氮 蔗糖 源——蛋白胨；无机盐——包含N、P、K、 铵盐或硝酸盐 Fe、Zn、Ca等的大量元素和包含Mn、Mo