产蛋母鸡群体日常观察要点.pdfVIP

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产蛋母鸡群体日常观察要点 康 艳’,吴金平 ,王俊峰。,姜福龙· 1.辽宁省丹东市振安区汤山城镇动物防疫监督所,辽宁 丹东 118121; 2.辽宁省丹东市宽甸县宽甸镇动物防疫监督所,辽宁 宽甸 118200; 3.辽宁省丹东市宽甸县牛毛坞动物防疫监督所,辽宁 宽甸 118200; 4.辽宁省丹东市宽甸县长甸动物防疫监督所,辽宁 宽甸 1182OO) 中图分类号 $831.4 1 文献标识码 B 文章编号 1 672—9692(2008)02一O007—02 日常观察在产蛋母鸡各项饲养管理工作中起 母鸡日常观察的五字方针,即“看、听、摸、 着非常重要的作用。认真细致的日常观察能够准 查、定”。 确地掌握鸡群的动态,及时发现存在的问题,并 1 看 采取科学的处理措施,从而降低饲养成本,提高 通过对采食、饮水、产蛋、粪便、精神状况 经济效益。经过长时间的观察,笔者总结出产蛋 及主要外貌特征的观察,掌握鸡群的整体情况, 并及时发现问题。 [收稿日期]2007—12—28 ,c{ ,c{ ,c{ ,c{ 《 、驴 《 、:{ 《 、驴 《 、:Z ,c{ 6.2 血清学检测法 血清学诊断主要包括:血 基团所吸收,仪器检测不到R所发出的荧光信 凝、血凝抑制、琼扩、ELISA等方法,这些方法 号;当PCR反应进行到延伸阶段时,Taq酶在引 具有灵敏度差,易于造成假阴性;存在窗口期; 物的引导下,以4种核苷酸为底物,根据碱基配 特异性差,易于造成假阳性;对于由疫苗、母源 对的原则,沿着模板链合成新链;当链的延伸延 抗体造成的阳性样品无法鉴别等缺点。 伸到探针结合部位时,受到探针的阻碍而无法继 6.3 分子生物学诊断 对核酸进行检测通过 续,此时的Taq酶发挥它的5 3 外切核酸酶的 PCR放大信号,并通过PCR一电泳、荧光PCR这 功能,将探针水解成单核苷酸,消除阻碍,与此 两种方法对PCR产物进行检测。核酸检测具有 同时标记在探针上的R基团游离出来,R所发出 准确(直接检测病毒核酸)、灵敏(通过PCR对信 的荧光再不为Q所吸收而被检测仪所接收;在 号放大100万倍)、可区分新城疫强毒与疫苗毒, Taq酶的作用下继续延伸过程合成完整的新链, 可排除由灭活苗造成的影响、安全 (病毒直接被 R和Q基团均游离于溶液中,仪器可继续检测到 杀死,大大降低病毒扩散的可能性)等优点。核 R所发出的荧光信号。 酸检测与鸡胚病毒分离相比,只要严格按照使用 6.3.2 荧光PCR检测技术与PCR一电泳相比所 手册进行实验室分区及实验操作,几乎不存在假 具有的优点 ①灵敏度大大提高。荧光PCR由 阳性。 机器检测扩增产物,最少可检出0.1 ng扩增产 6.3.1 荧光PCR原理 荧光PCR是目前诊断禽 物;PCR一电泳由肉眼检测,至少需100 ng扩增 流感的一项最新技术,其原理是根据病毒特有基 产物才能检出。②人为污染大大降低。PCR一电 因序列,合成一对特异性引物和一条特异性的荧 泳由于要打开PCR管盖,取出PCR产物进行电 光双标记探针。探针的结合部位位于目的扩增片 泳分析,不可避免地要造成气溶胶污染,而且无 段内部。探针的5 端和3 端分别标记不同的荧光 法清理,假阳性率极高;荧光PCR无需开盖, 素,如5 端标记FAM荧光素,它发出的荧光能 仪器对PCR过程进行实时监控,PCR结束即可 够被检测仪器接收,称为报告荧光基团 (用R表 得到结果,从根本上杜绝了气溶胶污染造成的假 示),3 端一般标记TAMPA荧光素,它在近距离 阳性。③快速。省却了电泳和剧毒EB染色,加 内能吸收5 端报告荧光基团发出的荧光信号,称 之采用快速的ROCHE荧光PCR仪,每批样品的 为淬灭基团 (用Q表示)。当PCR反应在退火阶 试验全过程只需不到4 h,是目前检测禽流感最 段时,一对引物和一条探针同时与目的基因片段 快速准确的方法。M 结合,此时探针上R基团发出的荧光信号被Q 2008.2 1.1 采食及饮水 健康高产鸡群表现

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