高效液相色谱法测定乳炎消中橙皮苷含量 .docVIP

高效液相色谱法测定乳炎消中橙皮苷含量 摘　要：目的：建立乳炎消含量测定方法。方法：采用液相色谱法测定乳炎消胶囊中橙皮苷的含量。以Shim－peck CLC－ODS(6.0mm×240mm)为色谱柱，以甲醇-0.025mol/L磷酸(40：60)为流动相。检测波长284nm。结果：橙皮苷对照品进样量在0.027-0.24μg范围内线性关系良好。方法的回收率为97.3％(n=5)，RSD为1.70％。结论：本方法快速、准确，方法的稳定性、重现性良好。可用于乳炎消的质量控制。 关键词：乳炎消；橙皮苷；液相色谱法 　 乳炎消由橘叶、丹参等10余味中药组成，具有疏肝理气活血化瘀之功效。橘叶为方中君药，主要含有橙皮苷等活性成分。为控制其质量，本文采用液相色谱法测定制剂中橙皮苷的含量。方法与结果如下。 1　仪器与试药 仪器：日本岛津LC-6A液相色谱仪，中北工作站，SPD-6AV紫外一可见检测器。 试药：橙皮苷对照品由中国药品生物制品检定所提供。 2 方法与结果 2．1色谱条件色谱柱Shim―pack CLC―ODS(6.0mm×240mm)，流动相为甲醇-0.025mol/L磷酸(柏：60)，检测波长284nm。理论塔板数按橙皮苷色谱峰计算，不得低于3000。 2．2对照品溶液制备精密称取橙皮苷对照品13.6mg。置100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取2～10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，制成每1mL含0.0272mg的溶液。 2．3供试品溶液制备取本品，研细，取粉末2g，精密称定，精密加入甲醇50mL，置具塞锥形瓶中，称重，超声处理30min(功率250W，频率33kHz)，放冷，称重，补足原重量，滤过，溶液经微孔虑膜(0.451μm)滤过，续滤液备用。 2．4阴性液制备及干扰试验考察按处方去除橘叶外的其它药材，按样品制备工艺制备，再按供试品溶液制备方法操作，制成阴性液，按上述方法分别吸取对照液5μL、供试液、阴性液各10μL，注入液相色谱仪中，按前述色谱条件操作，绘制色谱峰，测定结果提示：供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，具有相同保留时间的色谱峰，阴性液无干扰。见图1。 2．5线性关系考察分别精密吸取对照液1.0、3.0、5.0、7.0、9.OμL，注入液相色谱仪中，按前述色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，以进样量为横坐标，绘制标准曲线。经回归处理，Y=1407362.1X-15647，r=0.9998，橙皮苷进样量在0.027-0.24μg范围内线性关系良好。 2．6精密度试验考察精密吸取供试品溶液10μL，连续进样5次，在上述色谱条件下，测定色谱峰面积，测定结果RSD为1.62％。 2．7稳定性试验考察精密吸取同一供试品溶液10μL，按0、2、4、6、8h间隔，在前述色谱条件下进样分析，测定色谱峰面积，测定结果RSD为1.83％。 2．8重复性试验分别取5份样品，每份各10g，研细，取粉末2g，按供试品溶液制备方法操作，按前述色谱条件进行分析，样品中橙皮苷含量为0.342mg/g，RSD为1.83％。 2．9 回收率试验采用加样回收法，精密吸取已知含量的样品粉末1g，共5份，分别加以橙皮苷对照品(0.070mg/mL)5.00mL，按供试品溶液制备方法操作，结果见表1。 3 讨论 本试验先后采用甲醇-0.025mol/L磷酸 (50：50)，甲醇-0.025mol/L磷酸(40:60)为流动相，在第2个条件下，供试液中橙皮苷与相邻组分分离效果好，达到基线分离。 本试验曾采用超声处理法、热回流法制备供试液，试验结果提示超声处理法方法简便，便于生产的快速检验，故将此法列入含量测定项下。 1