高效液相色谱法测定复肝康胶囊中大黄素含量.docVIP

高效液相色谱法测定复肝康胶囊中大黄素含量邓 波　段艳杰　茹 波　沙延淳 摘　要：目的：研究复肝康胶囊的含量测定方法学，治疗慢性肝炎。方法：采用高效液相色谱法，进行该制剂的有效成分大黄素的含量测定研究。结果：平均回收率98.65％，RSD=O.98％。结论：HPLC法测定大黄素含量方法简便，快捷，含量稳定、重现性好，可以作为质量控制指标。 关键词：复肝康胶囊；大黄素；含量测定；高效液相色谱法 中图分类号：R285.5　文献标识码：A 文章编号：1673－7717(2007)07－1509－01 复肝康胶囊是由柴胡、丹参、虎杖、黄芪、红花等药材制成的用于治疗慢性肝炎的新药。其具有理血疏肝、益脾解毒之功效。主治肝郁不舒、气滞血瘀所致情志失和，胁肋胀满作痛；痛有定处，腹满、纳呆、乏力等症的慢性肝炎。为控制中药质量，本文采用高效液相色谱法，测定复肝康胶囊中大黄素的含量，方法简便，快捷，效果良好。 1 仪器与试剂 日本岛津LC－10AT高效液相色谱仪，LC－10AVP泵，SPD－10AV检测器，Anastar色谱工作站，HU3120B超声提取器。大黄素对照品购自中国药品生物制品检定所；复肝康胶囊由辽宁省医药工业研究院提供；甲醇为色谱纯，其它试剂为分析纯。 2　方法与结果 2．1 色谱条件色谱柱：DiamomilTM C18s 5μm(200mm×4.6mm)色谱柱；流动相：甲醇－0.1％磷酸溶液(85：15)；流速：1.0mL/min；检测波长：254nm。在此条件下，理论板数应不低于3000。 2．2　溶液制备及测定对照品溶液的制备：取大黄素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含50μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品5粒的内容物，研细，取约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，超声处理(功率250w，频率50kHz)30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。 2．3 线性关系的考察精密称取大黄素对照品10.04mg，加甲醇溶解并稀释摇匀，制成每1mL含50.20p,g的溶液，精密吸取2、6、10、14、18μL分别注入液相色谱仪中，测定色谱峰面积，以进样量为横座标，色谱峰面积为纵座标，绘制标准曲线，经线性回归，回归方程为：Y=1851058X－8480，r=0.9994，结果显示，大黄素进样量在0.10－0.91μg范围内呈良好的线性关系。 2．4　精密度试验精密吸取同一供试品溶液，连续进样6次，测定大黄素色谱峰面积，得ILSD为0.77％。 2．5　稳定性试验精密吸取供试品溶液，每隔2h进样1次，共测定5次，测定大黄素色谱峰面积，RSD=1.17％，说明供试品溶液含量在8h内稳定。 2．6　重复性试验考察取本品5份，按供试品溶液的制备方法处理，测定结果，其大黄素平均含量为0.32mg/粒，RSD值为1.79％。 2．7 加样回收率试验取已知含量的本品5份，每份各10粒，研细，取粉末0.15g，精密称定，精密加入大黄素对照品溶液(0.0905mg/mL)1mL，依法测定，测定结果见表1。 2．8　样品的测定按上述的制备方法及色谱条件共对3批样品进行大黄素含量测定，大黄素的含量见表2。 3　讨　论 本试验曾先后采用甲醇－水(85：15)；甲醇－水(90：10)；甲醇－水－冰醋酸(85：14：1)；甲醇－0.1％磷酸溶液(85：15)为流动相，经多次试验确定甲醇－0.1％磷酸溶液(85：15)为流动相，结果显示供试液中大黄素与其它组分分离度良好，含量稳定、重现性好，可用于质量控制。 根据3批样品测定结果，可定本品每粒含虎杖以大黄素(C15H10O5)计，不得少于0.25mg。 1