盐酸法舒地尔对大鼠癫痫持续状态海马神经元保护作用.docVIP

盐酸法舒地尔对大鼠癫痫持续状态海马神经元保护作用摘要：目的 探讨盐酸法舒地尔对大鼠癫痫持续状态(SE)后凋亡的影响及其可能作用机制。方法 将大鼠随机分成3组，对照组（A组）、模型组（B组）和盐酸法舒地尔组（C组），对采用氯化锂 ________________________________________ 匹罗卡品诱发癫痫大鼠模型的海马神经元细胞，采用免疫组化法对TUNEL、XIAP及Caspase ________________________________________ 9阳性细胞进行测定。结果 模型组海马神经元细胞TUNEL、XIAP及Caspase ________________________________________ 9较对照组明显增多(P　　 2.3 AP和Caspase ________________________________________ 9检测 A组大鼠海马未见XIAP和Caspase ________________________________________ 9阳性细胞出现。B组6 h有大量XIAP和Caspase ________________________________________ 9阳性细胞出现，12 h到达高峰；C组与B组相比，各时间点XIAP阳性细胞数均显著增加（P0.05），Caspase ________________________________________ 9阳性细胞数均显著减少（P0.05）。详见表2、表3。 表2 B组与C组大鼠SE后海马XIAP阳性细胞数(x±s) 3 讨 论 目前认为至少有三条信号通路参与细胞的凋亡:线粒体通路、死亡受体通路、内皮网通路。Caspase是细胞凋亡的核心,在这三条凋亡通路中几乎涉及Caspase的级联反应［1］。凋亡过程可划分为启动、效应、降解3个功能截然不同的阶段,而Caspase ________________________________________ 9是最主要的凋亡启动分子，是线粒体凋亡途径的关键蛋白酶,处于Caspase“瀑布式”的顶端，它可以启动Caspase的级联反应,并激活下游的Caspase ________________________________________ 3，从而完成对其相应底物的切割,引起细胞凋亡［2］。 XIAP是一种细胞内源性的抗凋亡蛋白，属于凋亡抑制蛋白家族（IAPs)。而XIAP是该家族中结构最典型、作用最强、功能最全面的Caspase抑制因子。它含有三个结构域：BIR、RING和CARD，其中特征性功能结构为氨基端的3个BIR结构域：BIR1、BIR2和BIR3。XIAP主要通过BIR3结构域与Caspase ________________________________________ 9单体相结合，形成异源性二聚体，使Caspase ________________________________________ 9失去单体结构而丧失其催化活性，当BIR3结构域发生突变后，XIAP将会失去对Caspase ________________________________________ 9的抑制作用。 盐酸法舒地尔是一种Rho激酶(ROCK)特异性抑制剂，起初认为其仅是一种细胞内钙离子拮抗剂，可以抑制蛋白激酶A/C/G和肌球蛋白轻链激酶，从而使血管平滑肌舒张、血管扩张［3］。脑缺血后缺血神经元轴突内ROCK蛋白表达增加、活性增强［4 ________________________________________ 6］，盐酸法舒地尔不仅可以通过以上的作用机制来缓解脑缺血症状，还可以通过直接作用于受损的神经元而发挥神经元保护作用。本实验研究表明，预先给予盐酸法舒地尔不仅能延迟SE出现的时间,并且能减轻癫痫发作级别以及神经元的损伤程度；盐酸法舒地尔可能是通过上调SE大鼠脑组织XIAP的表达而抑制Caspase ________________________________________ 9产生,从而发挥神经元保护作用。 参考文献： ［1］ Thornberry NA,Lazebnik Y.Caspases:Enemies within［Ｊ］.Science,1998,281(5381):1312 ________________________________________ 1316. ［2］ Fujit