靶向Livin的microRNA干扰对人卵巢癌细胞SKOV3体外作用的探究.pdfVIP

’ ；f—j，jj“- I 中文摘要… 英文摘要… 研究论文 刖吾”’ 材料与 结果… 附图… 附表… 讨论···…·············……···················…··················…··········29 结论·········…···························“········“···“···一···一·“·········32 参考文献………………………………………………………………33 综述卵巢癌相关microRNA的研究进展………………………………38 致谓十”·····…”……··“““““”···…一““”·········……-．··…一“””、····…50 个人简历……………………………………………………………………51 中文摘要 i Vi i 靶向L n的mcroRNA干扰对人卵巢 癌细胞$KOV3体外作用的研究 摘 要 mRNA 并转染人卵巢浆液性乳头状腺癌SKOV3细胞，检测转染前后Livin 的表达变化以及细胞增殖、凋亡和周期的改变。探讨针对凋亡抑制基因 Livin的靶向治疗对卵巢癌逆转的可行性，为卵巢癌靶向性治疗提供理论 基础和实验依据。 方法： 1．体外复苏、培养并连续传代人卵巢浆液性乳头状腺癌SKOV3细胞， 并于倒置显微镜下观察细胞的形态。 载体，该载体表达绿色荧光。用脂质体法转染对数生长期的SKOV3细胞。 分别于转染后24h、48h在荧光显微镜下观察细胞的形态和荧光细胞数， 以判断转染的效率。 mRNA 3．采用逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染前后Livin 表达水平的变化。 细胞体外生长的增殖抑制作用。 分布及凋亡的影响。 结果： 照组培养基清亮，细胞生长密集，光泽度好；转染组细胞密度较对照组低， 光泽度下降，荧光显微镜下可见部分细胞呈现绿色荧光。转染后48h，对 照组细胞已有重叠生长，转染组细胞贴壁率下降，贴壁细胞在荧光显微镜 下呈现绿色荧光，荧光细胞数占细胞总数70％．80％，证明转染成功。 ＼ 中文摘要 mRNA 两个亚基条带与内参条带灰度值比。Livina在对照组和阴性转染组灰度比 转染组灰度比值明显小于对照组和阴性转染组，组间比较差异有显著性(P 对照组和阴性转染组，组间比较差异有显著性(Po．05)。以上结果显示 Livin 癌SKOV3细胞具有可行性。 3．四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测结果显示：以阴性转染组、实 生长抑制率的影响呈一定的时间依赖性。 对照组无明显凋亡峰出现，各转染组在细胞周期Gl期前出现了亚二倍体 凋亡峰且S期细胞比例下降，G0／Gl期细胞比例上升，凋亡率增高。对照 组，组间比较差异有显著性(Po．05)；对照组及阴性转染组细胞增殖指数