骨髓干细胞在小球硬化微环境中的分化.pdfVIP

骨髓干细胞在肾小球硬化微环境中的分化 中文摘要 目的通过研究骨髓干细胞在肾小球硬化病理微环境下的分化，探讨肾脏病 慢性进展及肾小球硬化的机制。 方法80只C57BL／6雌性小鼠放疗骨髓清空后移植入雄性EGFP转基因的 C57BL／6小鼠骨髓干细胞，骨髓重建，4周后随机分为两个组：(1)骨髓移植+ 肾小球硬化组(BMSC+GS组)：左肾切除，术后7天、28天阿霉素尾静脉注射 镜肾脏病理改变；(3)石蜡切片免疫组化及冰冻切片荧光显微镜检测EGFP阳性 细胞在肾组织中的定位；(4)免疫荧光双标激光共聚焦显微镜观察EGFP阳性细 胞的位置和形态，了解骨髓干细胞分化为肾实质细胞的情况；观察 EGFP+／a．SMA+细胞，了解骨髓干细胞是否分化为基质分泌细胞。 结果(1)尿蛋白：Control组和BMSC+Sham组各时间点均为阴性， BMSC+GS组第2周始出现弱阳性，随时间延长，渐转为阳性；血BUN和Cr． 组各时间点无明显改变，BMSC+GS组第4周出现系膜增生，第12至16周局灶 节段性肾小球硬化成模； (3)免疫组化及荧光EGFP检测：BMSC+Sham组各 个时间点肾小球和肾小管间质部位均可见少量表达。BMSC+GS组第2周和第4 周主要表达于肾小球区，随着时间的推移，肾小球区减少，肾小管间质区增多； (4)激光共聚焦显微镜免疫荧光双标EGFP+／a．SMA+细胞检测：从第2周开始， 肾小球和肾间质内均可见EGFP+／a．SMA+细胞，而且随着时间的延长表达渐多。 结论(1)在肾小球硬化的病理微环境中，骨髓干细胞可归巢并定植于损 伤的肾组织。 (2)在肾小球硬化的病理微环境中，骨髓干细胞可以分化为肾实 质细胞如肾小球系膜细胞、上皮细胞、内皮细胞和肾小管上皮细胞，同时也可以 分化为基质分泌细胞，参与肾小球硬化和间质纤维化的形成。 【关键词】骨髓干细胞肾小球硬化微环境a．平滑肌肌动蛋白细胞外基质 2 TheDifferentiationofBoneMarrowStenlCellsinthe Mieroenvironmentof Glomeruloselerosis Abstract To thedifferentiationofbonemallOWstemcellsinthe obiecfiveinvestigate microenvironmentof to the ofchronic glomerulosclerosis．And exploreprogress diseaseandthemechanismsof kidney glomerulosclerosis． Methods C57BL／6malemicelabeledwith Transgenic enhanced green flouresent bonemarrow C57BL／6femalemice donors，80 protein(EGFP)were withoutfluorescence mice bonemarrow labelces，recipients．Femaleaccepted mononuclearcellslabeledEGFPafterthetotal radiation．Four