七氟醚预处理对成年大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血脑屏障保护作用和其机制研究.pdfVIP

复旦大学附属华山医院2010年博士论文 1．中文摘要 七氟醚预处理对成年大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后 血脑屏障保护作用及其机制研究 流行病学研究发现，一些神经外科、血管外科和心血管手术(如：颈动脉内 膜剥脱术、颅内动脉瘤切除术、深低温下主动脉修补术)存在较高的脑缺血再灌 注损伤的风险。围术期脑缺血再灌注损伤可导致患者术后不可逆的神经功能损 害。虽然，过去的几十年研究使我们对脑缺血再灌注损伤的机制有了较为深入的 了解，但是目前仍缺乏有效的治疗手段和干预措施。近年来的研究显示，吸入麻 醉药预处理，可以模拟缺血预处理，减轻脑缺血再灌注损伤。其保护机制涉及调 节脑电生理和脑代谢、抗谷氨酸兴奋毒作用、抗氧化应激和抗凋亡等众多环节。 但是，吸入麻醉药预处理对脑缺血再灌注损伤后血脑屏障(blood．brain barrier, BBB)影响的相关研究很少。现有的研究发现，脑缺血可引起细胞粘附分子(cell adhesion molecules，CAMs)和基质金属蛋白酶(matrix 的表达增加，前者介导白细胞浸润和迁移至受损脑组织，后者水解基底膜和紧密 缺血损伤。因此，我们提出假设：七氟醚预处理能有效减轻局灶性脑缺血再灌注 损伤，这种保护作用与其抑制CAMs和MMPs的表达，减轻BBB破坏有关。 我们采用大脑中动脉栓塞模型(middlecerebral artery 拟局灶性脑缺血再灌注损伤。成年SD雄性大鼠在MCAO手术前连续4天给予 1．2％七氟醚吸入治疗(预处理)，每天30分钟。第五天行MCAO手术，缺血时 程为60分钟。在MCAO术后第一天至第三天对大鼠进行神经功能缺陷评分。透 射电镜和Evansblue(EB)含量检测于术后第二天进行，以评估脑缺血再灌注损 伤后BBB的完整性。采用westernblot、明胶酶谱技术和免疫荧光技术等分析脑 星形胶质细胞的活化情况。 研究结果显示，连续多次七氟醚预处理可以显著减轻局灶性脑缺血再灌注损 伤引起的神经功能缺陷。电镜结果和EB含量检测结果都证实七氟醚预处理减轻 了脑缺血再灌注引起的BBB的破坏。七氟醚预处理抑制了脑缺血再灌注损伤引 adhesion 起的细胞间粘附分子．1(intercellular 粘附分子．1(vascularcelladhesion inhibitorof 金属蛋白酶组织抑制因子．1(tissue 复旦大学附属华山医院2010年博士论文 上调和occludin的缺失，同时抑制了脑损伤侧皮层、纹状体和胼胝体脑区的星形 胶质细胞和小胶质细胞的活化，从而发挥神经保护作用。 总之，连续多次七氟醚预处理可以显著降低大鼠脑缺血再灌注损伤引起的神 经功能缺陷。七氟醚预处理可以抑制脑缺血再灌注损伤引起的CAMs和MMPs 的上调和TJs的缺失，而且可以抑制小胶质细胞和星形胶质细胞的激活，通过减 轻脑损伤后BBB的破坏，起到神经保护作用。因此，七氟醚预处理的神经保护 作用对脑缺血再灌注损伤的治疗具有重要意义。 关键词：缺血再灌注损伤、预处理、七氟醚、神经保护、血脑屏障 ‘ 中国图书分类号：R614．2+1 2 复旦大学附属华山医院2010年博士论文 2．Abstract EffectsandMechanismsofSevoflurane Neuroprotecfive Preconditioningby Blood·-brain--barrierafterFocalCerebrallschemiaand Attenuating Leakage