胱抑素C检验项目试剂标准操作规程(SOP)-CYSC.doc

试剂标准操作规程 项 目 胱抑素C（CysC） 方 法 免疫比浊法 编写人 日期 审核人 日期 批准人 日期 文件分发部门和/或个人 本规程自 年 月 日起实施，每 年复审一次 医务科保管者 院长办公室保管者 院档案室保管者 检验科主任 临床化学检验室 目 录 检测原理 标本采集与处理 2.1 受检者的准备 2.2 静脉采血 2.3 抗凝剂 2.4 标本处理 3. 试剂 3.1 试剂 3.2 校准血清 3.3 试剂与校准血清的稳定性 4. 仪器 5. 操作 6. 计算 7. 操作性能 7.1 精密度 7.2 准确度 7.3 灵敏度 7.4 可报告范围 7.5 特异性 7.6 干扰 8. 参考值 9. 临床意义 1. 检测原理 试剂中包含胶体金颗粒与抗CysC的多克隆抗体结合。胶体颗粒在546nm有最大吸收，当和样本中的CysC抗原发生凝集，在546nm吸光度下降，吸光度值决定于CysC的浓度。根据标准曲线可以检测出样本中CysC的含量。 2． 标本采集与处理 2.1 受检者的准备： 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.2 静脉采血： 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 2.3 抗凝剂： 血浆使用EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。 2.4 标本处理： 血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，置洁净试管加盖低温保存。 3．试剂 3.1 试剂： 本科使用北京利德曼生化技术有限公司CysC试剂盒，为液体双试剂，各组分如下： R1：缓冲液（PH=6.7）。 R2：胶体金包被的抗体。 3.2：校准血清 专用校准液。 校准频次： 全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。 3.3 试剂与质控血清的稳定性： 原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存60天。 试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂颜色为紫红色，当试剂变色，按照试剂失效处理。 CysC专用质控在2-8℃储存至标签所示失效日期。 4．仪器 BEAKMAN LX20型号仪器。 5．操作 样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。 试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。 6．计算 c＝ ΧCO 式中：c—— 测定血清胱抑素C浓度，mg/L； △A测定—— 标本管吸光度； △A标准—— 标准管吸光度； CO—— 校准液中胱抑素C浓度，mg /L； △A ＝A2－A1 测定标准液系列的吸光度，建立吸光度-浓度对应关系的工作曲线。测定标本的吸光度，并在工作曲线上读取浓度值（mg/L）。如标本的吸光度值超过线性范围，则需稀释标本后，重新测量。 7．操作性能 7.1 精密度： 批内CV 1.82%，批间CV2.73%。 7.2 准确度： 测量结果在利德曼专用质控靶值±2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。 7.3 灵敏度： CysC浓度为：0.5mg/L时，吸光度ΔA546nm约为0.044。 7.4 可报告范围： 血清与试剂用量之比为3:240:60时，测定上限为8.0mg/L。 7.5 特异性： 测量值在给定值的95%-105％范围内。 7.6 干扰： 内源性干扰物血色素3g/L、胆红素200mg/L、乳糜5000FTU或风湿因子1000IU/Ml。抗凝剂：EDTA-2Na2g/L，肝素钠100IU/Ml，柠檬酸钠20g/L，氟化钠4g/L，对测试结果无明显影响。 8．参考值 男性:0.63-1.25 mg/L ;女性: 0.54-1.15 mg/L. 9．临床意义 本试剂盒用于检验血清中CysC含量。胱抑素C是一种非糖化的蛋白，是半胱氨酸蛋白酶抑制剂的一种，它由大多数有核细胞以一种恒定的方式产生。其分子量小，生成率稳定，由于其在血清中的浓度与肾小球滤过率（GFR）有密切的关系，并且对肾小球滤过率比肌酐更为敏感。因此，胱抑素C对测定肾小球滤过率有极其重要的意义。 文件号： 第 版 页数 2 共 4 页 聊城