第四章 有机物定量分析.ppt

有机定量分析 有机定量分析 有机定量分析是指对于混合物中某一已知组分或几种组分的含量测定。 在生产和科研中用于： (1)食品或天然、产物中的糖、蛋白质、氨基酸、维生素等 成分含量分析。 (2)医药、兽药饲料添加剂农药中的有效成分分析。 (3)环境保护方面对于空气、水体、土壤中的污染成分分析 四 植物叶子叶绿素含量的测定 原理： 绿色植物色素主要是叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素。在用丙酮提取的植物色素中选择叶绿素a、 b 单色光波长的最大吸收峰633 nm和645 nm 的波长测吸光度。又知叶绿素a、叶绿素b 分别在633 nm的吸收系数为82.04和9.27在 645 nm波长下的吸收系数为16.75和45.60。 材料、仪器设备 仪器：分光光度计，电子天平，研钵、小漏斗、棕色容量瓶，定量滤纸，吸水纸，檫镜纸，滴管。 试剂：80%的丙酮，石英沙，碳酸钙粉末。 取新鲜绿色叶片，檫净叶片表面污物，（去掉中脉）剪碎，混均匀。 水杨酰腙钠盐酰基氮原子上的氢原子有酸性 ，可以与烯醇式形成平衡。KOH在非水溶剂DMSO中的碱性比在水溶液中大约强104倍，而且浓度比酰腙的烯醇式大得多，故可以将酰腙全部转变成烯醇式负离子而显色 。 仪器与试剂 722分光光度计； 高效液相色谱仪检测纯度为99.5%） ；恒温油浴锅；所用玻璃仪器均需无水； 1，4—二氮氧喹喔啉甲醛—水杨酰腙（自合成，DMSO中三次重结晶至熔点不变 ； KOH的DMSO溶液（将分析纯的KOH溶于DMSO中配称成饱和溶液,浓度约4%）。 分析方法 二氮氧喹喔啉甲醛—水杨酰腙 的标准溶液吸光度的测定 称取纯度为99.5%的二氮氧喹喔啉甲醛—水杨酰腙20mg置于150mL 具塞瓶中，加入约90mL的DMSO，塞好塞子（注意，DMSO 极易吸潮！）50℃恒温油浴溶解。然后转入100mL容量瓶，用8mL DMSO分两次洗涤具塞瓶，洗液转入容量瓶，摇匀，DMSO定容后作为标准样品溶液(0.2 mg/mL)。 取8个10mL容量瓶，每个容量瓶中用移液管分别加入5mL饱和KOH的DMSO溶液,再依次加入0.05、0.1、0.2、0.3、0.5、1.0、1.2、1.5 mL标准溶液，摇匀，DMSO定容。5min显色，用试剂空白对照，1cm比色皿在波长440nm处测其吸光度。平行实验三次，取其平均值作定量分析。 结果与讨论 用最小二乘法处理表1的数据得如下回归方程： A = 0.0563C －0.019，r = 0.999；在1.00—30.0×10-4mg/mL的浓度范围内符合朗伯—比耳定律。 显色剂浓度 用氢氧化钾显色,由于KOH在DMSO 中溶解度有限，浓度选择范围不大。在显色液中氢氧化钾浓度为0.5%时，较高浓度的酰腙（20—40×10-4 mg/mL）能够较好的服朗伯—比耳定律；KOH浓度接近于4%时，较低浓度的酰腙（0.5—20×10-4mg/mL）能够较好的服从朗伯—比耳定律。取KOH浓度为1~2%时比较适宜 。 八:药物普马嗪、氯丙嗪、异丙嗪分离与鉴定 　　原理：普马嗪、氯丙嗪、异丙嗪都属于吩噻嗪类药物，与氯化钯反应生成蓝色络合物。三者混合液用乙酸乙酯萃取，普马嗪不转入乙酸乙酯中。故可用分光光度法测定普马嗪、氯丙嗪和异丙嗪。 　　又异丙嗪与硫酸汞生成红色物质，普马嗪和氯丙嗪呈负反应，故可以测定异丙嗪。 普马嗪、氯丙嗪、异丙嗪的测定 操作：取含有样品50—150ug的水溶液1毫升，加入5毫升缓冲溶液和0.5毫升氯化钯溶液，加水成7毫升混匀，显色15分钟。以试剂为空白，在500 nm波长处测吸光度。 用同样方法测试标准溶液的吸光度，并绘制标准曲线。折算样品含量。 氯丙嗪和异丙嗪的测定 与50毫升漏斗中加入5毫升缓冲溶液，0.5毫升氯化钯溶液，加入含有500微克/毫升氯丙嗪和异丙嗪的样品，加水1毫升混匀。加入10毫升乙酸乙酯，萃取。用1N的盐酸5毫升洗涤乙酸乙酯，5分钟后在440 nm波长处测吸光度 用同样方法测试标准溶液的吸光度，并绘制标准曲线。折算样品含量 异丙嗪的测定 取含50—100毫克的样品1毫升加入1毫升硫酸汞溶液，水浴加热10分钟，冷却；加水至50毫升，10分钟后显色。以1毫升试剂加4毫升水为空白对照，在500 nm波长处测吸光度。 用同样方法测试标准溶液的吸光度，并绘制标准曲线。折算样品含量。 吩噻嗪基本结构式： 农药有效成分含量分析 农药有效成分含量分析一般用气相色谱或液相色谱分析法。 如杀虫剂久效磷的含量分析用液相色谱法。 如右旋反式烯丙菊酯的含量用气相色谱法。 久效磷分析方法提要： 试样用甲醇溶解。以甲醇/水为流动相，在Lichrosorb