电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠纤溶活性和相关因子影响实验地研究.docxVIP

湖北中医学院２００３袋硕士研究生毕业论文刖舌脑血管病是常见病、多发病，死亡率与致残率均高，它与心脏病、恶性肿瘤构成多数国家的三大致死疾病，严重威胁人类生命健康，特别对中、老年人。目前，尚无资料证明脑血管病的发病率、死亡率和总患病率有下降趋势，而且，随着人类老龄化，脑血管病的发病渐呈上升趋势，其中，又以缺血性脑血管病最为多见。随着对中风诊断、抢救水平的提高，其死亡率已大幅度下降，但致残率则明显上升，在我国，其致残率高达８ｏ％…。绝大多数患者都不同程度地丧失了生活自理能力或劳动能力，生活质量普遍低下，给病人及家属带来了极大的精神痛苦和经济负担。中风偏瘫历来为针灸科常见病，针灸为主综合干预是治疗中风偏瘫疗效较为理想的一种方法，对脑卒中患者采取有效的治疗，是保证他们早日康复的重要措施”１．因此，研究和防治缺血性脑损伤，是基础医学和临床医学的重点。脑组织对缺血特别敏感，脑供血一旦发生障碍，很快就会出现神经功能异常；缺血达一定程度后，脑细胞就不可避免的发生缺血坏死。脑组织对局部缺血较全脑缺血的耐受时间要长。实际上，局部脑缺血中心缺血区很快会发生坏死，只是缺血周边半暗带区对缺血的耐受时间较长，半暗带区神经功能伤失或基本伤失而神经细胞却依然存活。因此，治疗的主要目的是挽救那些还没有坏死的缺血周边半暗带区脑组织。Ｎａｇｙ”１认为脑缺血是由微循环水平降低而引起的徽血管病变，脑缺血再灌注损伤的主要因素是内皮细胞表面的抗凝血和白细胞粘附的变化。目前认识到内皮细胞并非单纯管腔内衬，其不仅具有屏障和物质转运功能，还具有复杂的内分泌功能，参与机体的凝血、纤溶、免疫、血管的生长和运动的调节。内皮细胞表面的ｔ．ＰＡ和ＰＡＪ．１相互作用是纤溶作用的重要环节“１，二者之间的动态平衡调节着纤溶状态，这其中ＰＡＩ．１对平衡起着决定性作用；由内皮细胞产生的ｖｏｎｗｉｌｌｅｂｒａｎｄ因子（血管性血友病因子，ｖｗＦ）是血小板粘附和聚集必需的辅助因子，检测血中ｖｗＦ的水平，可以作为反映内皮细胞的功能状态和损伤程度的指标。脑缺血再灌注损伤是一个十分复杂的病理生理过程，适当的脑保护治疗可以提高缺血脑组织对缺血损伤的耐受力。电针作为传统针灸与现代电刺激技术结合的产物，已在缺血性疾病的治疗中得到了应用，其治疗作用已被大量临床与实验研究所证实。病理形态学已证实针刺可显著缩小脑梗死的面积“１；可提高自由基的清除能力，有效改善缺血再灌注造成的神经元延迟性损伤“１；抑制细胞外ＥＡＡ的过量堆积…；可使全脑缺血再灌注模型大鼠缺血区脑组织活性ｃａＭ含量明显减低，发挥肯定的脑保护作用”１；可以抑制ＮＯｓ，减少ＮＯ的含量，从而降低自由基产生的迟发性神经元损害”１；可降低再灌注后升高的ｗＢｃ数量和ＴＮＦ．ａ、ＩＬ．６水平””；电针可显著降低ＩＬ．１Ｒ１ｍＲＮＡ和蛋白的表达，从而减轻缺血后ＩＬ．１Ｂ导致的缺血性脑损伤…１；可下调Ｂａｘ蛋白的表达，加强ｆｏｓ蛋白的显著表达，抑剑凋亡ｎ”。本课题在大鼠局灶性脑缺血再灌注模型（改良线栓法ＭｃＡＯ）的基础上，拟通过“启闭开窍，活血化瘀”针法，观察电针水沟、内关（双侧）穴对局灶脑缺血再灌注损伤模型大鼠血清ｖｗＦ、血浆ｔ—ＰＡ和ＰＡＩ一１的影响，从而使针灸治湖北中医学院２００３级颈士研究生毕业论文疗缺血性脑血管病的研究进一步深入，为针灸治疗缺血性脑血管病提供确切的理论依据，进一步推广针灸在脑梗塞中的治疗作用。湖北中医学院２００ｊ级硕士研究生毕业论文实验研究１材料与方法１．１实验材料１．１．１实验动物健康成年ｓＤ大鼠８０只，雌雄不拘，体重２２０±２０克，由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。于实验前一周一次性购进，饲养于安静、温暖避强光的环境中，室温２０ｏｃ，自由摄水饮食。１．１．２主要实验用品（１）ｖｗＦ免疫浊度试剂盒；ｔ—ＰＡ和ＰＡＩ一１发色底物试剂金（２）１０％水合氯醛（３）７５％医用酒精（４）Ｏ．９％生理盐水（５）酒精灯（６）０．１０９ｍｏｌ／１枸橼酸钠抗凝液１．１．３主要实验器械（１）苏州产环球牌２８号ｏ．５寸不锈钢毫针；电热烧灼器（上海医疗器械厂）；插管用线：无菌医用缝合尼龙线（上海医用缝合针厂）；１号手术缝合线；Ｇ６８０５电针治疗仪；３７ｏ恒温水浴箱；高速离心机；半自动生化分析仪；平底酶标仪（２）手术及其他器械：剪刀手术镊１ｍ注射器止血钳动脉夹眼科剪试营１．２实验方法１．２．１局灶脑缺血再灌注模型制备以改良的血管内栓线技术制备大鼠局造性脑缺血再灌注模型（１）线栓制备取３—０单尼龙线（直径ｏ．２００—０．２４９衄）５０姗，一端加热使之成光滑球面，并在距离球面１８ｍｍ处作标记，酒精清洁后置于生理盐水中备用。（２）模型制备大鼠造摸前禁食不禁水２４小时称重，以１ｏ％水合氯醛（３００ｍｇ／ｋｇ）腹腔注射麻醉．麻醉大鼠仰卧固定于手术台上，常规备皮消毒后，颈部正中切