CGRP对血管平滑肌细胞增殖和CDK2和Cyclin+E表达影响.pdfVIP

前 言 心血管系统重构现象是近年来增生性心血管疾病，如肥厚性心肌病、血管成形术后 再狭窄、高血压等发病机制方面的一大研究进展[1-2] 。在病理条件下，细胞内环境发生 变化，细胞表型改变引起细胞增殖/增生、肥大，导致心血管系统的功能障碍。心血管 疾病一直是危害人类健康的危险因素，其发病率有逐年增加的趋势。近年来研究认为， 心血管活性多肽，尤其是心血管组织局部分泌的、以旁分泌/ 自分泌方式发挥作用的活 性多肽是心脑血管疾病发病的重要因素，通过调节体内自身活性物质来治疗心血管疾病 可能是防治此类疾病发生发展的新思路。 降钙素/降钙素基因相关肽超家族包括降钙素（calcitonin ，CT ）、降钙素基因相关 肽（calcitonin-gene-related peptides ，CGRP ）、肾上腺髓质素（adrenomedullin，ADM ） 和胰淀粉样酶（amylin ，AMY ）。CGRP 是 1983 年Rosenfeld 等应用DNA 基因重组和 分子生物技术在小鼠甲状腺髓样癌C 细胞中发现的一种由37 个氨基酸组成的生物活性 多肽，是降钙素/降钙素基因相关肽基因的不同剪切产物[3] 。1984 年，Morris 等证实在 人体中有GCRP 。CGRP 分为α-CGRP 和β-CGRP 两种亚型，分别由不同基因编码。 α-CGRP 与降钙素为同一基因编码，即降钙素/ α-CGRP 基因。人降钙素/ α-CGRP 基 因位于11 号染色体短臂13-15 区，由6500 个碱基组成，有6 个外显子和5 个内含子。 降钙素/ α-CGRP 基因的 mRNA 前体经选择性剪切，在甲状腺滤泡旁细胞内翻译为降 钙素，而在神经系统则生成α-CGRP 。编码β-CGRP 的基因与降钙素/ α-CGRP 基因 具有高度同源性。人β-CGRP 基因位于11 号染色体长臂12 区，β-CGRP 主要在神经 系统表达。大鼠的α与β-CGRP 仅在第35 位有一个氨基酸的差异，而人的两种CGRP 在第3、22 和25 位氨基酸残基组成不同（在人则称为Ⅰ、Ⅱ-CGRP ），两者具有相似的 生物活性[4] 。在CGRP 的37 个氨基酸序列中，N 端第2 位与第7 位之间由二硫键相连 形成一个环状结构，C 端苯丙氨酸残基酰胺化，这两个结构为CT/CGRP 超家族个成员 所共有，也是结合受体和发挥生物活性所必需的。 CGRP 广泛分布于中枢和外周神经系统，是感觉神经C 类纤维的主要神经递质[5] ， 除了传导温痛感觉以外，还具有广泛的生物学效应，如对呼吸、消化、骨骼肌以及免疫 等系统均有重要作用。周围神经系统中，背根神经节（dorsal root ganglion ，DRG ）是 合成CGRP 的主要部位。含CGRP 的初级感觉神经元胞体位于DRG 中，在心血管系 统，含 CGRP 的神经纤维主要分布在血管外膜和中膜交界处，末梢深入到平滑肌肌层 9 及血管内膜，在血管壁内形成网状结构。CGRP 存在于神经末梢囊泡内，循环中的CGRP 是从血管壁上的感觉神经末梢持续释放出来，人血浆中 CGRP 的含量约为 2 ～ 35pmol·L-1 ，且有昼夜节律，在血浆中的半衰期大约为10 min。 CGRP 通过作用于细胞膜表面的CGRP 受体，所携带的信息通过受体-信号转导系 统将信息导入细胞内，从而表现出CGRP 不同的生物学功能。CGRP 受体由受体组分蛋 白（receptor component protein ，RCP ）或降钙素受体样受体（calcitonin-receptor-like receptor ，CRLR ）和受体活性修饰蛋白（receptor activity-modifying proteins ，RAMPs ） [6] 组成，广泛存在于血管内皮和血管平滑肌细胞 。CRLR 是一个与G 蛋白偶联的孤儿受 体，并在细胞膜形成 7 个跨膜区，应用转基因技术研究发现 CRLR 必须结合 RAMPs [7-8] 才能形成功能受体 。目前发现RAMPs 有三个蛋白亚型，即RAMP1 、RAMP2 、RAMP3 。 RAMP1 在骨骼肌、胰腺及