HPLC同时测定辛芳鼻炎胶囊中木兰脂素及欧前胡素.docVIP

HPLC同时测定辛芳鼻炎胶囊中木兰脂素及欧前胡素 　辛芳鼻炎胶囊由辛夷、白芷等成分组成，具有发表散风、清热解毒、宣肺通窍的功效，临床广泛应用于慢性鼻炎、鼻窦炎等症的治疗。现收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十五册，其质量检测仅有白芷药材的薄层色谱鉴别（TLC），且白芷药材的TLC鉴别易受其它药材的干扰，致使检测结果不明显。为了更好地控制产品质量，保证临床使用安全有效，本文用HPLC法同时测定该制剂中木兰脂素和欧前胡素的含量，以期为建立辛芳鼻炎胶囊新的质量标准奠定基础。　　文献显示，木兰脂素和欧前胡素[1～3]分别是该中成药中辛夷和白芷的主要指标成分；本文采用HPLC同时对木兰脂素和欧前胡素2种成分定量检测，简化了操作程序，降低了工作量，实现了对该制剂中2种指标成分含量的同时测定。　　1 仪器与试药　　1.1 仪器 Agilent 1260高效液相色谱仪系统（安捷伦科技公司），电子天平（岛津AEL-200）；电子天平（赛多利斯BP2110-OCE），超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司KQ-500E），紫外分光光度计（TV：199011901）。　　1.2 材料及试药 木兰脂素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110882-200605，供含量测定用，置五氧化二磷减压干燥器中干燥12 h以上使用）；欧前胡素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110826-201013，含量以99.6%计，供含量测定用）；辛芳鼻炎胶囊（山西华康药业股份有限公司，产品批号2013080120131004）；甲醇、乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。　　2 方法与结果　　2.1 色谱条件 色谱柱为CAPCELL PAK-C18（5 mu;m，4.6 mmI.D.times;250 mm）；流动相为乙腈-水（52：48）；柱温为30℃，流速为1.0 mL/min；检测波长为230 nm；进样量为10mu;L。木兰脂素在约8.3min出现色谱峰，欧前胡素在约15.3 min出现色谱峰，混合对照品分别在约8.3 min和15.3 min出现色谱峰，见图1。　　2.2 溶液的制备　　2.2.1 对照品溶液的制备 取木兰脂素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110882-200605，供含量测定用，置五氧化二磷减压干燥器中干燥12 h以上使用）适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含木兰脂素0.1 mg的溶液，即得。取欧前胡素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110826-201013，含量以99.6%计，供含量测定用）适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含欧前胡素10 mu;g的溶液，即得。　　2.2.2 供试品溶液的制备 取样品约1.0 g，精密称定，置100 mL锥形瓶中，精密加入甲醇10 mL，称重，超声处理（功率240W，频率45kHz）30 min，放冷，补重，摇匀，滤过，取续滤液，即得。　　2.2.3 阴性供试品溶液的制备 按处方比例称取缺辛夷、白芷以外的其他药材，按制备工艺制成阴性制剂，再按2.2.2 项下的方法制备阴性供试品溶液。　　2.3 方法学考察　　2.3.1 专属性实验 分别精密吸取阴性供试品溶液、混合对照品溶液、供试品溶液各10 mu;L注入液相色谱仪，依法测定。木兰脂素和欧前胡素的保留时间分别约为8.3，15.3 min，与混合对照品溶液的色谱保留时间一致；阴性供试品溶液在该色谱条件下对测定无干扰。　　2.3.2 线性关系 考察精密吸取上述混合对照品溶液2、4、6、8、10、15、20 mu;L分别注入液相色谱仪，测定峰面积，以进样量（mu;g）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。结果表明，木兰脂素、欧前胡素分别在8～80 mu;g，0.02028～0.2028 mu;g范围内，进样量和峰面积呈良好的线性关系，且r值分别为0.9999、0.9999。　　2.3.3 精密度试验 精密吸取同一混合对照品溶液，按2.1项下的方法连续进样6次，分别测定木兰脂素、欧前胡素的峰面积，峰面积RSD分别为0.2%、0.4%。　　2.3.4 重复性试验 取同一批号辛芳鼻炎胶囊6份，按2.2.2项下方法制备供试品溶液，依法测定，计算，结果木兰脂素、欧前胡素的含量分别为3、5550、0、0851 mg/g，RSD分别为1%、1.2%。　　2.3.5 中间精密度试验 用Agilent 1100高效液相色谱仪（安捷伦科技公司），CAPCELL PAK-C18色谱柱（5 mu;m，4.6 mmI.D.times;250 mm）；在不同人员操作下，精密吸取同一混合对照品溶液，按2.1项下的方法连续进样6次，分别测定木兰脂素、欧前胡素的峰面积，峰面积RSD分别为0.09%、0