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HPLC测定夏桑菊颗粒中蒙花苷含量 　 作者：黄晓文，谢艳婷，冯嘉欣，谢銮凤 【摘要】; 目的 建立夏桑菊颗粒中蒙花苷的测定方法。方法 采用反相高效液相色谱法，色谱柱：DiamonsilTMC18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，迪马公司）；流动相为甲醇四氢呋喃水(43∶5∶52),检测波长334 nm，流速1.0 mL·min-1，柱温30 ℃。结果 蒙花苷在0.048～0.959 μg范围内线形关系良好，r=0.9999，平均加样回收率为100.7%，RSD为0.86%（n=6）。结论 所建立的方法准确，重现性好，灵敏度高,可用于该制剂的质量控制。 【关键词】; 夏桑菊颗粒；蒙花苷；高效液相色谱法 　　夏桑菊颗粒收载于《卫生部药品标准》中药成方标准第15册,由夏枯草、野菊花、桑叶3味中药组成，具有清肝明目、疏风散热作用，用于治疗风热感冒、目赤头痛、头晕耳鸣、咽喉肿痛等症。野菊花是本制剂的主要成分之一，蒙花苷是野菊花的特征成分［1-2］，文献［3-5］ 报道以高效液相色谱法测定野菊花制剂中蒙花苷含量，主要采用加甲醇超声处理或回流提取的方法，本文根据蒙花苷不溶于水的性质［6］，以正丁醇萃取法提取蒙花苷，建立高效液相色谱法测定夏桑菊颗粒中蒙花苷含量的方法，结果准确、灵敏，阴性对照不干扰，为该制剂的质量控制提供依据。 　　1 仪器与试药 　　1．1; 仪器 ; 　　 　　日本岛津高效液相色谱仪（LC10Avp溶剂输送泵、SPD10Avp紫外可见检测器、SCL10Avp系统控制器、CTO10ASvp柱温箱）；岛津Lcsolution工作站；日本岛津AUW220D电子天平；HH2恒温水浴锅。 　　1．2; 药品与试剂 ; 　　 　　蒙花苷对照品：由中国药品生物制品检定所提供，批号110752200511，供含量测定用，质量分数95.9%。夏桑菊颗粒：广州星群（药业）股份有限公司。甲醇、四氢呋喃为色谱纯，水为双蒸水，正丁醇为分析纯。 　　2; 方法与结果 　　2.1; 溶液的制备 　　2．1．1; 对照品溶液 　　精密称取经五氧化二磷干燥12 h的蒙花苷对照品5.00 mg，置100 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得质量浓度为47.95 μg·mL-1的蒙花苷对照品贮备液。精密量取3.0 mL，置10 mL容量瓶，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（质量浓度为14.39 μg·mL-1）。 　　2.1.2; 供试品溶液; 　　取装量差异项下的本品，研细，取5 g，精密称定，加水45 mL使溶解，用以水饱和的正丁醇提取 3次，每次正丁醇的用量分别为25、20、20 mL，合并正丁醇液；用以正丁醇饱和的水20 mL洗涤，洗涤后的水层用以水饱和的20 mL正丁醇提取,合并正丁醇液，水浴蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，移至25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 　　2.1.3; 阴性对照液 ; 　　取处方中除野菊花外的其余成分制成不含野菊花的阴性对照品，按“2.1.2”项下的方法制备野菊花阴性对照溶液。 　　　2.2; 色谱条件及系统适应性试验 ; 　　 　　色谱柱：DiamonsilTM C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，迪马公司）；流动相∶甲醇四氢呋喃水(体积比43∶5∶52)；流速：1.0 mL·min-1；检测波长334 nm；柱温为30 ℃。分别取蒙花苷对照品溶液、供试品溶液和野菊花阴性对照溶液各20 μL，按上述色谱条件，注入色谱仪。蒙花苷与样品中相邻色谱峰的分离度大于2.0,理论板数以蒙花苷计算应不低于2 500,阴性对照没有干扰。蒙花苷对照品、供试品溶液及阴性对照溶液的色谱图见图1、2、3。 　　2.3; 方法学考察 　　2.3.1; 线性关系考察; 　　精密吸取0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL的蒙花苷对照品贮备液，置10 mL的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，得质量浓度分别为2.40、4.80、9.59、19.18、28.77、38.36、47.95 μg· mL-1的系列对照品溶液。吸取上述系列对照品溶液各20 μL，分别进样测定，以峰面积（A）对溶液的质量浓度（ρ）进行回归，得回归方程A=43690ρ-5780，r=0.999 9，表明蒙花苷在0.048～0.959; μg之间与峰面积线性关系良好。 　　2.3.2; 精密度试验; 　　取蒙花苷对照溶液20 μL，注入色谱仪，连续测定6次，记录峰面积，结果蒙花苷峰面积的平均值为607 366，RSD为0.40%,表明仪器精密度良好。 　　2.3.3; 重复性试验; 　　取同一批号（批号DA11008）的样品6份，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，进样测定