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莪术醇对斑马鱼胚胎发育影响 　 作者：田丽莉，董建勇，黄长江 【摘要】 目的 ：研究莪术醇对斑马鱼胚胎发育的影响。方法：以孵育6 h的斑马鱼胚胎为实验模型，设空白对照组和莪术醇组，观察记录发育畸形、孵化率、心率、自主运动次数及仔鱼的泳速。结果：莪术醇可致斑马鱼身体弯曲，EC50(96 h)为51.17 mg·L-1;能明显降低胚胎孵化率(Plt;0.05);使心率显著降低(Plt;0.05)，且呈剂量依赖性。低浓度莪术醇可显著促进斑马鱼自主运动(Plt;0.01);能明显减小仔鱼的泳速(Plt;0.05)。结论：莪术醇对斑马鱼胚胎的发育有一定影响。 【关键词】 莪术醇;斑马鱼胚胎;畸形;孵化率;心率;自主运动;泳速 　　Abstract: Objective: To study the developmental effects of Curcumol on embryo-larval zebrafish.　　Methods: The 6 h post-fertilization zebrafish was randomly divided into control group and different　　concentration of the Curcumol groups based on concrete experiment，then non-lethal malformation，hatching rate，heart beat，spontaneous movement and swimming velocity were observed and recordedin detail at specified stages. Results: The abnormality of zebrafish was observed with EC50 (96h) 51.17 mg·L-1 for curved body axis;Curcumol made hatching rate lower(Plt;0.05)，heart beatdecreased(Plt;0.05)in concentration-dependent way. The low concentration Curcumol could stimulatespontane-ous movement(Plt;0.01)and reduce the swimming velocity compared to the control group.Conclusion: Curcumol is developmentally toxic effect on zebrafish in early life stage. 　　Key words: Curcumol;zebrafish;malformation;hatching rate;heart beat;spontaneous　　movement;swimming velocity 　　莪术醇是莪术油主要有效成分之一[1]。《中国药典》(2005年版)规定莪术醇为临床抗病毒、抗肿瘤用药莪术油质量控制的指标成分。莪术醇在体外能抑制金黄色葡萄球菌、β溶血性链球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌的生长[2];对呼吸道合胞病毒有直接抑制作用，对流感病毒A和A3型有直接灭活作用[3-4]。莪术醇也是一种有发展前途的抗肿瘤药物[5]，可通过与半胱天冬蛋白酶无关的线粒体途径诱导人肺腺瘤(ASTC-a-1)细胞凋亡[6]。但莪术醇毒理学的研　　究鲜见系统文献报道。近年来，斑马鱼生物模式愈多地应用于药物毒性评价[7]。本实验以斑马鱼胚胎为模型，研究莪术醇对斑马鱼胚胎的发育毒性，为临床安全用药提供初步研究资料。 　　1 材料和方法 　　1.1 动物 　　无病原体AB品系斑马鱼，由温州医学院水域科学与环境生态研究所提供。斑马鱼饲养于全封闭循环系统，养殖和繁殖均参照Zebrafish Book标准，鱼房内光照/黑暗比为14/10，室内温度26 ℃，水温28 ℃，pH 6.8～7.5，电导率850～900，其各项水质指标均合要求。取健康性成熟的斑马鱼，雌雄交配繁殖获得受精卵。将受精卵收集清洗后移入培养皿，在光照/黑暗比为14/10、28 ℃的人工气候箱内孵育至6 h。 　　1.2 试药与仪器 　　莪术醇由本实验室从莪术油中分离得到，经气相色谱鉴定纯度为99.2%;二甲基亚砜(分析纯、批号0902106、上海展云化工有限公司);Rxz 智能型人工气候箱(宁波市科技园区新江南仪器有限公司);Nikon Eelipsete2000倒置显微镜(日本尼康公司);PB0105J运动测试仪(