连翘提取物对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬及NO释放影响.docVIP

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连翘提取物对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬及NO释放影响

连翘提取物对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬及NO释放影响   作者:尹乐乐, 曾耀英, 侯会娜 【摘要】   目的: 分析连翘(FS )对小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和体外NO释放的影响。方法: 无菌收集小鼠腹腔巨噬细胞和羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDASE)标记大肠杆菌DH5α, 短期培养3 h后流式细胞术(FCM)分析FS对腹腔巨噬细胞体外吞噬的影响。用LPS体外刺激活化腹腔巨噬细胞, Griess Reagent试剂盒检测并分析FS对巨噬细胞体外释放NO的影响。结果: FCM分析显示, 终浓度为40、 80、 160 mg/L的FS对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬具有明显的促进作用(Plt;0.05)。不同终质量浓度的FS对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞体外NO的释放均有抑制作用(Plt;0.05)。结论: FS可以促进小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和抑制NO体外的释放。 【关键词】 连翘提取物 腹腔巨噬细胞 吞噬 NO释放   [Abstract] AIM: To investigate the effect of forsythia suspensa (FS) extract on phagocytosis of peritoneal macrophages and NO production in vitro. METHODS: The peritoneal macrophagess were isolated from BALB/c mice. After stained with CFDASE, the DH5α were cocultured with peritoneal macrophagess for 3 h. The effect of FS extract on cytophagocytesis in vitro was analyzed by flow cytometry. The peritoneal macrophages were stimulated and activated by LPS in vitro. The effect of FS extract on NO production of the peritoneal macrophages in vitro was measured by NO assay kit. RESULTS: FCM analysis showed that FS extract significantly promoted the phagocytosis of peritoneal macrophages at the final concentration of 40, 80, 160 mg/L, respectively (Plt;0.05). It also decreased the production of NO at different concentration induced by LPS (Plt;0.05). CONCLUSION: FS extract can promote phagocytosis of peritoneal macrophages and inhibit NO production in vitro.   [Keywords]forsythia suspensa extract;peritoneal macrophages;phagocytosis; NO production   连翘(forsythia suspensa, FS)又名旱莲子、 大翘子、 落翘等, 为木犀科植物连翘的果实。它作为传统中药广泛应用于对炎症、 发热和溃疡等方面的治疗[1]。同时, FS的主要活性成分连翘苷在抗氧化、 抗菌、 抗病毒和解热抗炎等方面[2]也起着重要的作用。本研究我们通过检测FS对小鼠腹腔内巨噬细胞体外吞噬和NO释放的影响, 进一步研究其免疫学效应。   1 材料和方法   1.1 材料 清洁级BALB/c近交系小鼠(雄性, 8~10周龄, 体质量20~22 g)购自广东省实验动物中心。FS购自四川广汗市维康植化有限公司。L谷氨酰胺、 β巯基乙醇、 刀豆蛋白A(concanavalin A, ConA)购自Sigma公司。羧基荧光素乙酰乙酸(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFDASE)购自美国Molecular Probes 公司。RPMI1640、 胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)为美国GibcoBRL公司产品。Griess Reagent试剂盒为美国Promega公司产

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