生物工程导论-细胞工程.ppt

* HAT系次黄嘌呤（hypoxantin）、氨基蝶呤（aminopterin）和胸腺嘧啶脱氧核苷（thymidin）三种物质各英文首字之缀列，HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。 * GENE 细胞系 细胞系-肿瘤细胞系 肿瘤细胞系多由癌瘤建成，多呈类上皮型细胞，常已传几十代或百代以上，并具有不死性和异体接种致瘤性。 　　对已建成的各种细胞系或细胞株习惯上都给以名称；细胞的命名无严格统一规定，大多采用有一定意义缩写字或代号表示。但不论什么形式，均不宜太长，以便记忆和了解，今别举以下几种代表性的细胞名称供参考 HeLa：为供体患者的姓名（来源于宫颈癌） CHO：中国地鼠卵巢细胞（ChineseHamsterOvary） 宫-743：宫颈癌上皮细胞，1974年3月建立 NIH3T3：美国国立卫生研究所（National Institute of Health）建立；每3天传代，每次接种3×105细胞／毫升。 X射线诱导4种细胞系的DNA损伤与剂量的关系 红细胞系 细胞株 通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株（Cell Strain），也就是说，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。 　　原代培养物经首次传代成功后即为细胞系(cell line)， 由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系(finite cell line)， 如可以连续培养， 则称为连续细胞系(continuous cell line)， 培养50代以上并无限培养下去 细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞。从培养代数来讲，可培养到40-50代。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。对于人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。 哺乳动物细胞的种类及性能 某些常用细胞系 细胞系 型态 来源 物种 发育阶段 倍数性 特征 来源于正常组织的有限细胞系 IMR-90 成纤维细胞 肺 人 胚胎 二倍体 易受人类病毒感染、接触抑制 MRC-5 成纤维细胞 肺 人 胚胎 二倍体 易受人类病毒感染、接触抑制 来源于正常组织的连续化细胞系 293 成纤维细胞 肾 人 胚胎 非整倍体 极易转染 BHK21-C13 成纤维细胞 肾 Syrian 仓鼠 新生仓鼠 非整倍体 可被多瘤转变 CHO-K1 成纤维细胞 卵巢 中国仓鼠 成体 非整倍体 简单染色体核型 来源于瘤组织中的连续细胞系 B16 成纤维细胞 黑素瘤 小鼠 成体 非整倍体 黑素 C1300 神经元细胞 神经母细胞瘤 大鼠 成体 非整倍体 神经炎 哺乳动物细胞的种类及性能 动物细胞大规模培养的细胞株及其产品 产品名称 细胞株 可医治的疾病 批准年份 组织纤溶酶原激活剂(TPA) CHO 心脏病 中风 1987 红细胞生成素(EPO) CHO 贫血 1989 人生长激素 C127 生长缓慢，肾功能不全 1989 粒细胞激活因子 CHO 中性白细胞减少症 1991 凝血第三因子 ? CHO BHK-21 A型血友病 1992 1993 脱氧核糖核酸酶 CHO 胆囊性纤维变性 1993 葡萄糖脑苷脂酶 CHO 高歇氏病 1994 干扰素 CHO 多硬化症 1996 凝血第四因子 CHO 血友病 1997 单克隆抗体 CHO 血管成形术中的血液凝集 1994 抗CD20 CHO 非何杰金氏淋巴瘤 1997 肿瘤坏死因子 CHO 活性克朗氏（肠炎）病 1998 肿瘤坏死因子受体 CHO 类风湿关节炎 1998 哺乳动物细胞的种类及性能 连续化细胞株的构建 原代培养后得到的细胞系，再经多次传代培养后，一部分细胞死亡，一部分细胞类型继续生长并转化为连续细胞系(continuous cell line)，若经过进一步的选择、克隆和定性，可以得到连续细胞株。 连续细胞系是经过环境驯化和/或基因修饰后得到的可以稳定继代的细胞系，常用于大规模培养。 转化时间和方式与细胞类型、培养条件等有关 除环境驯化外，还可以通过与永生细胞融合、病毒感染或肿瘤细胞基因转导等方法构建连续细胞系。 哺乳动物细胞的种类及性能 有限细胞系与连续细胞系的比较 性质 有限细胞系 连续细胞系 染色体倍数性(ploidy)