生物工程下游技术微载体培养技术.pptVIP

流感疫苗生产的大规模生产区域 (A) 细胞培养 (B) 离心分离(C) 超滤、洗滤。 Vero细胞流感疫苗生产图 (A) 未感染的细胞 (B) 早期细胞病变影响 (C) 收获前的晚期细胞病变 大规模流感病毒生产中细胞病变影响图片 * DEAE　葡聚糖凝胶　A-50：离子交换填料，纯化中等大小的生物分子（30-200KD）;表面包被薄层. 胶原基质的葡聚糖凝胶类微载体 * a.初期呈半球形，细胞轮廓清晰，球形饱满（接种后20分钟）；b.粘得不牢固，容易洗掉，留下痕迹（接种后30分钟）；c.细胞开始铺展，半球形变成扁平，轮廓模糊，边缘开始出现掕角（接种后60分钟）；d.细胞变成多边形或纺锤形，伸出伪足（接种后120分钟）；e.细胞迁移，寻找合适生存位置，留下尾迹；f.细胞膜与基质表面受力点不连续，接触面有间隙。 * (a)MCC细胞未铺展；(b)MCC细胞已铺展（因为有纤粘连蛋白充当桥梁作用）(c)Vero细胞呈纺锤形； (d)胞外基质成分层粘连蛋白促进Vero细胞铺展(e)胞外基质成分纤粘连蛋白促进Vero细胞铺展 * 驯化Vero细胞适应在用于大规模生产的无血清无蛋白培养基内生长。带有详细传代记录的Vero细胞冻存管被复苏；并传代到T形瓶和滚瓶中，生产出足够数量的细胞以接种Cytodex?3微载体生物反应器。细胞汇合后，细胞按照大约1:7的比例传代到后面的生物反应器。最终